[发明专利]一种提高尿促性素效价的方法在审
| 申请号： | 201711293332.3 | 申请日： | 2017-12-08 |
| 公开（公告）号： | CN109897095A | 公开（公告）日： | 2019-06-18 |
| 发明（设计）人： | 刘乃山;夏衬来;于晓娜 | 申请（专利权）人： | 青岛康原药业有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/59 | 分类号： | C07K14/59;C07K1/20;C07K1/18 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266300 山东省青岛*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 尿促性素 效价 层析技术纯化 离子交换层析 生产成本低 产品纯度 亲和层析 科研 | ||
1.一种提高尿促性素效价的方法，其特征在于，方法包括：将低效价尿促性素通过亲和层析、离子交换层析进行纯化，最终得到高纯度的尿促性素，其特征在于，该方法包括如下步骤：
尿促性素粗品用含NaCl、EDTA的Tris-HCl缓冲液溶解，离心去沉淀，得上清液；
亲和层析：用含NaCl的Tris-HCl平衡液平衡Argmatin- Sepharose柱，上清液上柱后，用含NaCl、盐酸胍的Tris-HCl缓冲液洗脱，洗脱液经超滤脱盐至无氯离子；
（3）离子交换层析：将上述超滤脱盐后的溶液加NaCl和1mol/L Tris-HCl稀释至一定浓度，上样于DEAE-Sepharose Fast Flow柱，用含NaCl的Tris-HCl平衡液冲洗，换用含不同浓度NaCl的Tris-HCl洗脱液洗脱；紫外检测，收集酶活性部分，超滤浓缩后冷冻干燥，即得成品。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的缓冲液是pH 6.0~8.0的含0.1~0.3mol/L NaCl、0.01~0.03 mol/L EDTA 的Tris-HCl缓冲液。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的平衡液是pH 6.0~8.0含0.1~0.3mol/L NaCl Tris-HCl缓冲液。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的洗脱液是pH 6.0~8.0含0.1~0.3mol/L NaCl、0.1~0.3mol/L盐酸胍的Tris-HCl缓冲液。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中所述稀释后的终浓度为pH 7.0~9.0含0.05~0.30mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲液。
6. 如权利要求1所述的方法，其特征在于， 步骤（3）中所述平衡液是pH 6.0~8.0含0.01~0.20mol/L NaCl 的Tris-HCl缓冲液。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中所述洗脱液用pH 6.0~8.0含0.1~0.3mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲液。
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