[发明专利]一种基于干血斑样本的百草枯定性定量检测方法

说明书

本发明涉及一种基于干血斑样本的百草枯定性定量检测方法，其特征在于：用干血斑法对样品进行前处理，用高效液相色谱/质谱联用分析法进行检测。本发明不需要大量采血、侵袭性较小，不需要离心分离血液、操作时间短，受艾滋病毒、乙型和丙型肝炎病毒等血源性传播病毒的干扰小、检出限低，并且干血斑允许样品在室温下稳定运输和储存，便于在取样地以外的地点或在其他时间进行复检。

技术领域

本发明关于生物检测技术领域，尤其涉及一种基于干血斑样本的百草枯定性定量检测方法。

背景技术

百草枯是一种对人类和动物均有剧毒的化合物，是人类急性中毒死亡率最高的除草剂，百草枯中毒导致高发病率和死亡率，且无特效药，口服中毒死亡率可以达到90％以上。随着百草枯等除草剂中毒病例的增多，该类毒物的定性、定量检测具有重要意义。可靠且高效的样品前处理方法是整个检测过程的首要环节，同时也是耗时最多的部分，占整个检测过程大约80％的时间。目前用于百草枯中毒血液样品预处理的方法主要为蛋白沉淀法、液液萃取和固相萃取(Solid-Phase Extraction，SPE)法等，然而这些预处理方法因血液基质的复杂性和样品的难保存性存在所需样本量大、操作繁复、回收率低、操作时间长、检出限(limit of determination，LOD)高等缺陷，当应用于法医毒物类案件鉴定时，现有方法需要对样品进行冷藏运输和储存，且易受其他血源性传播病毒的干扰。因此，选择高效、简单的样本制备方法和前处理过程，从而高效且精确地对血液中百草枯、敌草快等除草剂类药物进行定性和定量势在必行。

发明内容

针对现有技术中对百草枯中毒血液样品的预处理方法所需样本量大、操作繁复、回收率低、操作时间长、检出限高的技术问题，本发明提供了一种基于干血斑样本的百草枯定性定量检测方法。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种基于干血斑样本的百草枯定性定量检测方法，用干血斑法对样品进行前处理后再进行检测。

相对于现有技术而言，本发明使用了干血斑(dried blood spot，DBS)法，不需要大量采血、侵袭性较小，不需要离心分离血液、操作时间短，受艾滋病毒、乙型和丙型肝炎病毒等血源性传播病毒的干扰小、检出限低，并且干血斑允许样品在室温下稳定运输和储存，便于在取样地以外的地点或在其他时间进行复检。

附图说明

图1为百草枯多反应监测色谱图；

图2为内标乙基百草枯多反应监测色谱图；

图3为百草枯二级质谱图；

图4为内标乙基百草枯二级质谱图；

图5为百草枯标准曲线。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明实施例提供一种基于干血斑样本的百草枯定性定量检测方法，用干血斑法对样品进行前处理后再进行检测。

相对于现有技术而言，本发明不需要大量采血、侵袭性较小，不需要离心分离血液、操作时间短，受其他血液性传播病毒的干扰小、检出限低，并且干血斑允许样品在室温下稳定运输和储存，便于在取样地以外的地点或在其他时间进行复检。

进一步地，本发明还提供基于干血斑样本的百草枯定性定量检测方法的步骤：

步骤a、将待测血液制成干血斑；

步骤b、定量采取步骤a所得干血斑，提供内标物，将所述干血斑和所述内标物溶解后得待测溶液；