[发明专利]一种荧光免疫磁微粒定量检测O型口蹄疫抗体试剂盒

说明书

本发明公开了一种荧光免疫磁微粒定量检测O型口蹄疫抗体试剂盒，由O型口蹄疫抗体阴性血清、O型口蹄疫抗体阳性血清、VP1包被磁珠、生物素化羊抗猪抗体、链霉亲和素标记荧光物质、洗涤液和增强液组成。本发明的磁珠具有更大结合面积，大大提高检测范围，缩短反应时间，提高灵敏度。具有较宽的激发光谱、较窄发射光谱，有利于降低成本，提高灵敏度；比传统荧光物质检测范围更宽、特异性更好。采用链酶亲和素‑生物素信号放大系统，进一步提高了检测的灵敏度，比ELISA和化学发光灵敏度更高。配套全自动检测仪器，实现现场自动化操作，可同时检测一份或多份样本，操作简便快速、价格低廉。

技术领域

本发明涉及动物疫病检测技术领域，具体地说，本发明涉及一种荧光免疫磁微粒定量检测O型口蹄疫抗体试剂盒。

背景技术

口蹄疫病毒( Foot-and-mouth disease virus ,FMDV )可引起偶蹄动物的急性、热性、高度接触性传染病，即通常所说的口蹄疫( Foot and Mouth Disease ,FMD )。该病毒引起的病害具有传播迅速、感染率高的特点，主要通过呼吸道和消化道传播，仅数个感染性病毒粒子便可引起易感动物发病，甚至造成世界性的大流行，给畜牧业带来很严重的经济损失，因此FMDV是世界各国检疫和防疫的重点对象。FMDV为单股正链RNA病毒，基因组全长约8.5kb，编码组成病毒衣壳的蛋白为4种结构蛋白VP1、VP2、VP3和VP4以及10种成熟的非结构蛋白( L、2A、2B、2C、3A、3B、3C、3D及3AB和3ABC复合体)。在FMDV的4种结构蛋白中，VP1蛋白存在主要抗原位点，而且含有FMD病毒宿主识别位点。单独的VP1蛋白即可刺激机体产生中和抗体，是有效的目标抗原。

口蹄疫病毒目前有O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3（即南非1、2、3型）和Asia1（亚洲1型）7个血清型。各型之间几乎没有免疫保护力，感染了一型口蹄疫的动物仍可感染另一型口蹄疫病毒而发病。目前7个血清型中的O型、A型和Asia1型在中国交替流行，涉及面广、疫情复杂、破坏性强，造成很大危害。当前我国预防和控制口蹄疫主要以疫苗免疫为主，但FMDV的血清型众多，不同亚型的疫苗之间无交叉保护作用，且国内外口蹄疫疫苗质量参差不齐，因此建立一种简便、快速、灵敏度高的FMDV感染和/或免疫后抗体检测方法对预防和控制口蹄疫的发生和流行具有十分重要的意义。

传统的FMDV的检测方法主要是血清学诊断。在血清学诊断技术中，OIE推荐的检测FMDV抗体的标准方法为中和试验，但中和试验需要使用活病毒，需在特殊实验室完成，且操作费时。酶联免疫吸附分析法具有灵敏、特异性高等优点，但操作繁琐费时。化学发光法具有灵敏度高、特异性好的优点，但需要特殊、大型、昂贵设备，检测时间长。

发明内容

本发明的目的在于克服上述技术缺陷，提供一种成本低廉、操作简单、准确、灵敏的荧光免疫磁微粒定量检测O型口蹄疫抗体试剂盒。

为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种荧光免疫磁微粒定量检测O型口蹄疫抗体试剂盒，由O型口蹄疫抗体阴性血清、O型口蹄疫抗体阳性血清、VP1包被磁珠、生物素化羊抗猪抗体、链霉亲和素标记荧光物质、洗涤液和增强液组成。

在上述的荧光免疫磁微粒定量检测O型口蹄疫抗体试剂盒中，所述的VP1包被磁珠为带有官能团修饰的直径1~3μm的超顺磁珠与VP1蛋白的共价偶联物，其中所使用的磁珠为羧基磁珠、氨基磁珠、羟基磁珠、甲苯磺酰基磁珠、NHS磁珠、链酶亲和素磁珠、蛋白A磁珠、蛋白G磁珠、抗小鼠IgG磁珠、亲水磁珠、疏水磁珠中的一种或几种。