[发明专利]一种催化柚皮素生成山萘酚的融合酶及其应用有效
申请号: | 201711304614.9 | 申请日: | 2017-12-11 |
公开(公告)号: | CN108220260B | 公开(公告)日: | 2021-06-08 |
发明(设计)人: | 裴建军;赵林果;董萍;陈安娜 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C07K19/00;C12P17/06;C12R1/19 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 唐循文 |
地址: | 210037 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 催化 柚皮素 生成 萘酚 融合 及其 应用 | ||
1.一种催化柚皮素生成山萘酚的融合酶,其特征在于氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示。
2.编码权利要求1所述融合酶的基因,其特征在于核酸序列如SEQ ID NO:10所示。
3.含有权利要求2所述核苷酸序列的重组质粒。
4.含有权利要求3所述重组质粒的大肠杆菌。
5.权利要求1所述融合酶在催化柚皮素生成山萘酚中的应用。
6.权利要求4所述大肠杆菌在催化柚皮素生成山萘酚中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于步骤为将大肠杆菌在50 μg/mL氨苄青霉素的LB平板上经过37℃培养过夜,挑转化子到150 mL的LB培养基中,所述LB培养基内含有50μg/mL 氨苄青霉素,37℃,200 rpm振荡培养20 h,将种子液接入3 L发酵培养基中,37℃,并控制流加速度,使菌体浓度达到OD600 50–55,随后添加终浓度为0.1 mM IPTG,并每隔1 h添加终浓度为400 mg/L的柚皮素,30℃转化培养9 h,在转化过程中培养基葡萄糖浓度小于5g/L。
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