[发明专利]一种催化柚皮素生成山萘酚的融合酶及其应用有效

专利信息
申请号: 201711304614.9 申请日: 2017-12-11
公开(公告)号: CN108220260B 公开(公告)日: 2021-06-08
发明(设计)人: 裴建军;赵林果;董萍;陈安娜 申请(专利权)人: 南京林业大学
主分类号: C12N9/02 分类号: C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C07K19/00;C12P17/06;C12R1/19
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 唐循文
地址: 210037 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 催化 柚皮素 生成 萘酚 融合 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种催化柚皮素生成山萘酚的融合酶,其特征在于氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示。

2.编码权利要求1所述融合酶的基因,其特征在于核酸序列如SEQ ID NO:10所示。

3.含有权利要求2所述核苷酸序列的重组质粒。

4.含有权利要求3所述重组质粒的大肠杆菌。

5.权利要求1所述融合酶在催化柚皮素生成山萘酚中的应用。

6.权利要求4所述大肠杆菌在催化柚皮素生成山萘酚中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于步骤为将大肠杆菌在50 μg/mL氨苄青霉素的LB平板上经过37℃培养过夜,挑转化子到150 mL的LB培养基中,所述LB培养基内含有50μg/mL 氨苄青霉素,37℃,200 rpm振荡培养20 h,将种子液接入3 L发酵培养基中,37℃,并控制流加速度,使菌体浓度达到OD600 50–55,随后添加终浓度为0.1 mM IPTG,并每隔1 h添加终浓度为400 mg/L的柚皮素,30℃转化培养9 h,在转化过程中培养基葡萄糖浓度小于5g/L。

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