[发明专利]一种肺癌靶向自组装纳米粒的制备方法

说明书

本发明公开了一种具有肺癌靶向性的厄洛替尼修饰的壳聚糖与药物DOX和ICG的自组装纳米制剂。该纳米制剂是先通过化学偶联将肺癌分子靶向药物厄洛替尼连接到经过化学结构改造的壳聚糖上，再用厄洛替尼修饰的壳聚糖自组装包载吲哚菁绿ICG和多柔比星DOX而得到CEDI纳米制剂。本发明制备纳米粒，既利用了壳聚糖无毒、生物相容性高的特性，又大大提高了厄洛替尼的水溶性和生物利用度；同时利用厄洛替尼的分子靶向作用，可使包载的细胞毒药物和光敏剂选择性靶向到肺癌细胞，降低药物毒副作用；此外该纳米粒还可以同时进行分子靶向治疗、化疗和光动力治疗，并具有近红外荧光成像能力，提高治疗效果。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种厄洛替尼修饰的壳聚糖共同包载DOX和ICG的自组装纳米制剂。

背景技术

肺癌是严重威胁人类健康的常见恶性肿瘤，居我国恶性肿瘤发病率和死亡率第一位。按照组织学特点，肺癌可分为非小细胞肺癌（NSCLC）和小细胞肺癌（SCLC），其中NSCLC占肺癌总量的85%以上，大多数患者在确诊时已处于中晚期。从传统药物治疗到现代靶向药物治疗的不断发展，肺癌患者的生存期在不断延长，加上个体化治疗理念的引入，肺癌的治疗方式正在不断地扩大与更新，为广大肺癌患者带来福音。

厄洛替尼（Erlotinib）是癌症药物治疗的常用药物。厄洛替尼商品名特罗凯（Tevceva）。厄洛替尼的作用途径与传统化疗药物不同，它是一种靶向治疗药物，可特异性地针对肿瘤细胞作用，抑制肿瘤的形成和生长。它是一种小分子化合物，可抑制人表皮生长因子受体（EGFR）的信号传导途径，是表皮生长因子（又可称HER1）信号传导通路的关键组分，在多种肿瘤细胞的形成及生长中都扮演了重要的角色。厄洛替尼通过抑制酪氨酸激酶的活性的方式来抑制肿瘤生长，酪氨酸激酶是EGFR细胞内的重要组成部分之一。因此我们利用厄洛替尼来达到主动靶向的作用。

壳聚糖（Chitosan，Cs）是一种无毒、在体内可生物降解的天然多糖，由于制备方法和原料的不同，其相对分子量大大不同。Cs外观为白色或淡黄色半透明状固体，化学稳定性良好。由于Cs对皮肤和黏膜无刺激性，所以与人体具有很好的生物相容性。Cs既有氨基又有羟基，其结构易于化学修饰，是一种具有广泛应用前景的新型药物载体。此外，Cs本身具有确切的抗肿瘤作用，可能通过多种作用机制达到抑制肿瘤的作用。我们还可以将Cs制备为纳米载药微粒，将药物制备成纳米粒以后可以提高药物的稳定性，防止药物被生物酶降解，并可以实现药物的控释和靶向治疗的作用。

近红外（NIR）荧光染料由于具有了良好的组织渗透性，吸收的近红外光在生物组织中的穿透深度较大，而激发的荧光受生物组织本身的影响较小，所以可检测到深层组织的荧光信号。该类染料作为非侵入性的分子影像试剂在癌症的早期检测中具有良好的应用前景。其中最具代表性的为近红外菁染料，能够被肿瘤细胞摄取并富集，从而特异性成像。吲哚菁绿ICG是一种带负电荷的聚甲基菁染料，在近红外光谱范围内有较强吸收、毒性小、不参与体内生物转化、排泄迅速等优点，比CY3，CY5，CY7这些菁染料有着更高的吸收和发射波长，因此，我们选择吲哚菁绿ICG作为监测药物作用于活体动物的荧光标记和光动力治疗的光敏剂。

多柔比星DOX是一种抗肿瘤抗生素，可抑制RNA 和DNA的合成，对RNA的抑制作用最强，抗瘤谱较广，对多种肿瘤均有作用，属周期非特异性药物，对各种生长周期的肿瘤细胞都有杀灭作用。因此，我们选择多柔比星DOX来增强抗肿瘤效果。

基于以上背景，本发明利用连接了肺癌分子靶向药物厄洛替尼的壳聚糖自组装包载吲哚菁绿ICG和多柔比星DOX。由于纳米粒连接了分子靶向药物厄洛替尼，因而具有靶向输送的能力，并且纳米粒同时包载了DOX和ICG，使纳米粒具有协同分子靶向治疗、化疗和光动力治疗的能力以及ICG的近红外成像功能。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有肺癌靶向性的厄洛替尼修饰的壳聚糖共同包载DOX和ICG的自组装纳米制剂CEDI，该纳米粒主动靶向肺癌，进行近红外成像和协同分子靶向治疗、化疗和光动力治疗。