[发明专利]一种β-激动剂半抗原和人工抗体及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201711306446.7 申请日: 2017-12-11
公开(公告)号: CN108181463B 公开(公告)日: 2020-12-11
发明(设计)人: 雷红涛;姜文梦;王兰腾;沈兴;陈佳虹;孙远明;徐振林;李向梅 申请(专利权)人: 华南农业大学
主分类号: C07K14/765 分类号: C07K14/765;G01N33/558
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人: 单香杰
地址: 510642 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 激动剂 半抗原 人工 抗体 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种广谱特异性β-激动剂人工抗体,其特征在于,是由β-激动剂人工抗原作为免疫原制备后纯化得到,包括如下步骤:

1、免疫:

将β-激动剂人工抗原溶液与等量佐剂混合乳化,初次免疫与弗氏完全佐剂混合乳化后免疫,4周后使用免疫原与弗氏不完全佐剂乳化后加强免疫,每次加强免疫间隔3周,每次免疫剂量为6mL/只;第三次免疫后第7天开始取血检测抗血清效价,直至抗血清效价不再长,取血后采用室温自然凝固后分离抗血清,在4℃下放置过夜,于4000r/min条件下离心30min,取上层血清;

2、纯化:

(1)取3mL抗血清,加入2倍体积的0.06mol/L、pH为4.8的醋酸钠缓冲液;

(2)将225μL正辛酸边搅拌边逐滴加入样品液中,加完后继续搅拌30min,于4℃下静置2h;

(3)于4℃、10000r/min条件下离心10min,取上清,加入上清液1/10体积的0.1mol/L、pH为7.4的PBS溶液,用1mol/L NaOH溶液调节pH至7.4;

(4)冰浴条件下,加入0.277g/mL硫酸铵(使最终饱和度为45%),搅拌1h,于4℃、10000r/min条件下离心10min,弃上清;

(5)用2mL PBS溶液溶解沉淀,用0.01mol/L、pH为7.4的PBS溶液透析过夜,换液7次,得到纯化后的广谱特异性β-激动剂人工抗体;

所述β-激动剂人工抗原是由分子结构如下式(I)所示的β-激动剂半抗原与载体蛋白偶联得到;

2.权利要求1所述广谱特异性β-激动剂人工抗体在制备检测β-激动剂药物和/或其类似物的试剂盒中的应用。

3.一种检测β-激动剂药物和/或其类似物的试剂盒,其特征在于,含有权利要求1所述β-激动剂半抗原、β-激动剂人工抗原或广谱特异性β-激动剂人工抗体。

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