[发明专利]一种β-激动剂半抗原和人工抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种β‑激动剂半抗原，其分子结构如下式（I）所示：。本发明以R‑(‑)‑沙丁胺醇为原料，经一步化学反应成功合成了β‑激动剂半抗原。再将该半抗原与载体蛋白偶联制备人工抗原，经免疫后得到广谱特异性β‑激动剂人工抗体。该抗体可以识别31种β‑激动剂药物及其类似物，其中对R‑(‑)‑沙丁胺醇的半抑制浓度为0.5ng/mL，线性范围为0.11～40.86ng/mL，最低检测限为0.04ng/mL。该抗体能同时检测多种β‑激动剂类药物，可用于食品安全的现场快速检测，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及食品安全检测技术领域，具体地，涉及一种β-激动剂半抗原和人工抗体及其制备方法和应用。

背景技术

β-激动剂（β-agonist）是β-肾上腺素受体激动剂（β-adrenoceptor agonist）的简称，属于苯乙胺类药物的一种，β-激动剂从医学上分类归属于拟交感神经作用药，因其能够改变能量分配，降低脂肪生成，促进脂肪分解，促进蛋白质合成并减少其降解，上世纪80年代就有将β-激动剂添加到饲料中用以提高牛、羊、猪等牲畜的瘦肉生长率的相关报道。当人体累计摄入剂量超过阈值或食入高残留的动物内脏组织时，β-激动剂会产生明显的生理毒性，导致心悸、战栗、头晕目眩、恶心呕吐、血管舒张、神经过敏、心跳加速等症状，严重的甚至有可能导致死亡，因此世界各国已禁止将这类物质用于食品动物。

然而，作为“瘦肉精”使用的β-激动剂却先后出现，例如克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、溴布特罗等药物被不法商家用于谋取利益。其中，沙丁胺醇具有手性结构，在生理情况下，左旋异构体能更好的与受体结合表现出生理活性，因此R-(-)-沙丁胺醇多作为临床治疗哮喘等呼吸系统疾病的药物。R-(-)-沙丁胺醇作为沙丁胺醇外消旋体的活性结构，应该作为重点监控检测的对象，在食品加工、贮藏和销售等环节加强此类药物的监控检测是十分必要的。但是目前尚未出现对β-激动剂手性结构以及广谱特异性的检测方法。

目前，β-激动剂的检测方法主要有高效液相色谱（HPLC）、液相色谱-串联质谱（LC-MS或LC-MS/MS）、气相色谱（GC-MS）、毛细管电泳色谱（CE）等。这些方法虽然准确度高，但其仪器设备昂贵、样品前处理复杂繁琐、检测成本高且需要专业人员操作等，不能实现高通量快速检测的目的。而免疫检测方法具备快速、灵敏、准确、操作简便等特点，且对样品纯度要求不高，适用于大批量样品的现场快速检测。虽然目前多数检测β-激动剂的抗体均具有较高特异性，但却无法实现在同一实验中检测多种可能添加的β-激动剂。由于β-激动剂滥用的危害性较大，目前迫切需要能同时识别、检测多种β-激动剂的免疫检测方法，尤其是能够同时识别多种β-激动剂的抗体。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对现有技术中没有能同时识别多种β-激动剂的抗体，为了克服现有技术的上述不足，提供一种β-激动剂半抗原，以该半抗原与载体蛋白偶联制备的人工抗原为免疫原，制备的广谱特异性β-激动剂人工抗体，能同时检测多种β-激动剂类药物，可用于食品安全的现场快速检测。

本发明的目的是提供一种β-激动剂半抗原。

本发明的另一目的在于提供所述β-激动剂半抗原在制备β-激动剂人工抗原或抗体中的应用。

本发明的另一目的在于提供所述β-激动剂半抗原的制备方法。

本发明的另一目的在于提供一种β-激动剂人工抗原。

本发明的另一目的在于提供所述β-激动剂人工抗原的制备方法。

本发明的另一目的在于提供一种广谱特异性β-激动剂人工抗体。

本发明的另一目的在于提供所述广谱特异性β-激动剂人工抗体在制备检测β-激动剂药物和/或其类似物的试剂盒中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种检测β-激动剂药物和/或其类似物的试剂盒。