[发明专利]一种座壳孢发酵生产葡甘聚糖酶的培养基及方法

说明书

本发明公开了一种座壳孢发酵生产葡甘聚糖酶的培养基及方法。所述培养基的原料包括：3‑24 g/L木糖，2‑16g/L酵母浸膏，0.03‑1.92mol/L Mn²⁺和0.005‑0.04g/LVB₅；培养基初始pH=5.5‑7.0。该方法通过将发酵种子液接种于所述培养基中，250mL的三角瓶装液量为100mL，接种量5mL，于25℃，转速150r/min下培养。本发明的发酵方法具有发酵周期短；条件温和，容易控制；提供的用于座壳孢发酵生产葡甘聚糖酶的培养基，具有葡甘聚糖酶产率高，葡甘聚糖酶活力高等优点。

技术领域

本发明涉及真菌的发酵培养基及工艺；更具体地，本发明涉及一种座壳孢发酵生产葡甘聚糖酶的培养基及方法。

背景技术

座壳孢属于子囊菌门、粪菌纲、肉座菌目、麦角菌科，是一种昆虫病原真菌，作为一种生防真菌，在防治粉虱、蚧等园林害虫方面发挥着重要的作用。

葡甘聚糖酶主要水解β-1,4糖苷键，水解产物包括葡甘低聚糖，而葡甘低聚糖在降血脂、抗氧化等方面具有特殊的功能，因此具有较高的保健、营养价值，葡甘聚糖酶在乳白耙菌、细菌中都有分布，有很高的开发潜能。但是目前国内对于葡甘聚糖酶的研究尚处于开始阶段，葡甘聚糖酶产量低，酶活性低，对魔芋的综合开发利用产生了不利影响。作为今后酶工程研究的一个热点，葡甘聚糖酶具有重要的经济价值，在食品、保健领域具有良好的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种座壳孢发酵生产葡甘聚糖酶的培养基及方法。本发明提供的用于座壳孢发酵生产葡甘聚糖酶的培养基，具有葡甘聚糖酶产率高，葡甘聚糖酶活力高等优点。

为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种座壳孢发酵生产葡甘聚糖酶的培养基，所述培养基的原料含有3-24 g/L木糖，2-16g/L酵母浸膏，0.03-1.92mol/L Mn²⁺，0.005-0.04g/L VB₅，培养基初始 pH=5.5-7.0。更优选地，所述培养基的原料含有3 g/L木糖，4 g/L酵母浸膏，0.126 mol/L Mn²⁺，0.005 g/LVB₅，培 养 基 初 始pH=6.3。其次，本发明还提供了一种利用如上所述的培养基生产葡甘聚糖酶的方法，包括以下步骤：

（1）将座壳孢接种种子培养基，制得发酵种子液；

（2）将步骤（1）中制得的发酵种子液接种于如上所述的培养基，250mL 三角瓶装液量为50mL，接种量2.5mL，于25℃，转速150 r/min下培养。

所述种子培养基的原料含有：200g/L土豆，葡萄糖20g/L，自然pH。

本发明的有益效果在于：

1）采用本发明优化后的培养基生产葡甘聚糖酶，菌龄4d，发酵周期12h，座壳孢产葡甘聚糖酶的酶活为952U/mL以上；

2）本发明的发酵方法具有发酵周期短；条件温和，容易控制；提供的用于座壳孢发酵生产葡甘聚糖酶的培养基，具有葡甘聚糖酶产率高，葡甘聚糖酶活力高等优点。

附图说明

图1为甘露糖标准曲线。

具体实施方式

本发明用下列实施例来进一步说明本发明，但本发明的保护范围并不限于下列实施例。

实施例1

单因素实验确定培养基最优成分