[发明专利]一种固定化漆酶及其制备方法

权利要求书

1.一种固定化漆酶及其制备方法，其特征在于，所述固定化漆酶是由高岭土固定化漆酶制备得到；所述漆酶来自云芝，≥0.5units/mg；所述固定化漆酶的最适pH为4.5，最适温度为40℃；所述固定化漆酶制备方法包括以下步骤：

（1）先将高岭土置于100℃-120℃的条件下干燥4h-8h；

（2）将上述干燥好的高岭土与漆酶溶液进行混合，所述漆酶溶液中的初始漆酶浓度为0.05mg/mL~2.0mg/mL，所述漆酶溶液的pH值为3.0~7.0；然后将高岭土加入至所述漆酶溶液中，在25℃~35℃的温度下、150rpm~300rpm转速下对所述漆酶和高岭土混合溶液振荡15min~300min；

（3）将（2）中所得的固定化酶经过对应pH的缓冲溶液洗涤、5000rpm~10000rpm转速离心分离、-100℃下冷冻和真空干燥20h~24h后即可。

2.根据权利要求1所述的固定化漆酶的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，所述高岭土置于120℃的条件下干燥6h。

3.根据权利要求1所述的固定化漆酶基制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中，所述高岭土与漆酶的混合液中高岭土与漆酶的质量配比为1：（1~6）。

4.根据权利要求1所述的固定化漆酶的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中，所述漆酶溶液是由漆酶与柠檬酸缓冲液或磷酸缓冲液配制而成，所述柠檬酸缓冲液的pH值为3.0~6.0，所述磷酸缓冲液的pH值为7.0。

5.根据权利要求1所述的固定化漆酶的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中，所述漆酶溶液中漆酶的初始浓度为0.8mg/L，所述漆酶溶液的pH为5.0，所述反应温度为30℃，所述振荡的转速为200rpm，所述振荡的时间为15min。

6.根据权利要求1所述的固定化漆酶的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中，所述固定化漆酶的洗涤、分离、冷冻和干燥中，固定化漆酶经对应pH的缓冲溶液洗涤、6000rpm转速离心分离，-100℃下冷冻和干燥24h。