[发明专利]一种动物精子活动度测定前的预处理方法及其应用在审
| 申请号： | 201711327639.0 | 申请日： | 2017-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN109913406A | 公开（公告）日： | 2019-06-21 |
| 发明（设计）人： | 郑明岚;潘晓靓;张挺;王小康;常艳 | 申请（专利权）人： | 上海益诺思生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/076 | 分类号： | C12N5/076;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人： | 薛琦;朱水平 |
| 地址： | 201203 上海市浦东新区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 精子 孵育液 预处理 动物精子 附睾尾部 活动度 精子活动度检测 无血清培养液 精子悬浮液 牛血清蛋白 体积百分比 恒温孵育 死亡动物 孵育 混匀 剪碎 应用 配方 优化 | ||
1.一种动物精子活动度测定前的预处理方法，其特征在于，其包括以下步骤：
(1)迅速取死亡动物的附睾尾部置于(37±1)℃、pH为6.8～7.0的精子孵育液中；所述精子孵育液为含0.3～0.7％牛血清蛋白的无血清培养液，所述百分比为质量体积百分比；
(2)将所述附睾尾部剪碎，于所述精子孵育液中恒温孵育2～5分钟后混匀，得精子悬浮液。
2.如权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，步骤(1)中所述的无血清培养液为RPMI1640或者DMEM。
3.如权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，步骤(1)中所述孵育液为含0.5％牛血清蛋白的无血清培养液，所述百分比为质量体积百分比。
4.如权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，步骤(2)中所述恒温孵育的时间不超过3分钟。
5.如权利要求1～4任一项所述的预处理方法，其特征在于，所述的动物为猴、兔子、小鼠或者大鼠。
6.一种非诊断目的的动物精子活动度的测定方法，其特征在于，所述测定方法包括如权利要求1～5任一项所述的预处理方法。
7.如权利要求6所述的测定方法，其特征在于，所述方法包括：在所述预处理方法后，将所述精子悬浮液使用计算机辅助精子分析仪检测其中精子活动度。
8.一种精子孵育液，其特征在于，其为含0.3～0.7％牛血清蛋白的无血清培养液，所述百分比为质量体积百分比；较佳地，所述的无血清培养液为RPMI1640或者DMEM。
9.如权利要求8所述的精子孵育液，其特征在于，所述精子孵育液的pH为6.8～7.0。
10.一种含0.3～0.7％牛血清蛋白的无血清培养液在制备精子孵育液中的应用，所述百分比为质量体积百分比；较佳地，所述的无血清培养液为RPMI1640或者DMEM。
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