[发明专利]28个短串联重复序列的复合扩增体系、试剂盒及应用在审
申请号: | 201711328308.9 | 申请日: | 2017-12-13 |
公开(公告)号: | CN107841567A | 公开(公告)日: | 2018-03-27 |
发明(设计)人: | 于在亮;杨凡;郑玉;徐健;陈初光 | 申请(专利权)人: | 苏州阅微基因技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司32224 | 代理人: | 董建林,薛海霞 |
地址: | 215163 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 28 串联 重复 序列 复合 扩增 体系 试剂盒 应用 | ||
1.短串联重复序列的复合扩增体系,其特征在于,该复合扩增体系中包括28对引物,可同时扩增28个位点:D1S1656、D2S441、D2S1338、D3S1358、D4S2366、D5S818、D6S1043、D7S820、D8S1179、D10S1248、D12S391、D13S317、D16S539、D18S51、D19S433、D21S11、D22S1045、CSF1PO、FGA、Penta D、Penta E、TH01、TPOX、vWA、D11S2368、D14S608及Amelogenin,Y-indel;
所述的28对引物分别为:
2.根据权利要求1所述的复合扩增体系,其特征在于,所述复合扩增体系中的被扩增位点分别由五种颜色的荧光标记,相同荧光标记视为同一组,五组组合分别为:
第一组:TH01、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043;
第二组:Y-Indel、AMEL、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D;
第三组:D2S441、vWA、D8S1179、TPOX、Penta E;
第四组:D19S433、D22S1045、D2S1338、FGA;
第五组:D4S2366、D12S391、D1S1656、D10S1248、D11S2368、D14S608。
3.根据权利要求2所述的复合扩增体系,其特征在于,所述第一组的标记为FAM标记,第二组的标记为HEX标记,第三组的标记为TAMRA标记,第四组的标记为ROX标记,第五组为PURP标记。
4.根据权利要求1或2所述的复合扩增体系,其特征在于,所述扩增体系还包括PCR Master Mix和DNA模板。
5.根据权利要求4所述的PCR Master Mix,其特征在于,所述成分包括:10mM的硫酸铵,10mM的氯化钾,55mM的pH 8.3的Tris-HCl,2mM的镁离子,0.8ug/ul的BSA,5%的DMSO,8%的乙二醇,1mM的Na4P2O7和0.2mM的Dntp,以及2U的Taq酶。
6.根据权利要求1所述的复合扩增体系,其特征在于,所述扩增体系扩增时的反应条件为:
第1步:95℃变性5分钟,第2步:94℃变性20秒,第3步60℃退火2分钟,重复2至3步27次,最后60℃延伸10分钟。
7.根据权利要求1所述的复合扩增体系,其特征在于,各引物浓度范围为
8.一种试剂盒,包括权利要求1-7任一复合扩增体系。
9.权利要求1-7任一扩增体系或权利要求8所述的试剂盒在个体识别、家系鉴定中的应用。
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