[发明专利]原发性肝癌磁共振双靶点特异性分子探针及其制备方法

说明书

本发明公开了一种原发性肝癌MR双靶点特异性分子探针及其制备方法，包括载体，所述载体末端分别连接有两种能够与原发肝癌细胞特异性结合抗体：Anti‑AFP和Anti‑GPC3。所述载体选自超顺磁性氧化铁（SPIO）或超小超顺磁性氧化铁（USPIO）。对所述载体末端修饰后增加羧基，通过所述羧基分别连接Anti‑AFP和Anti‑GPC3。本发明有益效果：在一个分子探针上连接连个双靶点特异性抗体，可以显著提高对肝癌病灶，以及肝癌末血管侵犯病灶(MVI)检出率。同时也便于对原发性肝癌体外和活体分子成像研究。

技术领域

本发明属于医疗及分子影像学技术领域，具体地说，本发明涉及一种原发性肝癌磁共振(MR)双靶点特异性分子探针及其制备方法。

背景技术

磁共振检查具有软组织分辨率高、无电离辐射，能够提供多参数、多对比度图像等特点，已经成为肝脏占位病变临床影像学检查最重要的检查方法。但是，目前使用的或用于临床前期研究原发肝癌MR特异性分子探针均为甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)或磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3,GPC3)单分子靶点的分子探针，这些单靶点特异性分子探针存在检测灵敏度低，对于AFP或GPC3低表达得原发性肝癌就无法检测到，更是无法检测到小的肝癌病灶。

原发性肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是多种因素造成的多基因累积、多步骤和多阶段的过程，属于一种多基因复杂性状疾病。在其发生和发展过程涉及到不同的基因和不同表达形式。所以，单靶点的分子探针无法提高探测的灵敏度，致使无法检测到小的病灶，特别是肝癌微血管侵犯(microvascular invasion,MVI)病灶。肝细胞肝癌小病灶和MVI检出对于肝细胞肝癌治疗效果至关重要。

AFP和GPC3在原发性肝癌肝细胞呈现出高表达，但是有些肝癌细胞AFP表达并不高，有文献报道在AFP低表达的肝癌细胞GPC3呈现高的表达。AFP和GPC3在原发性肝癌检出中具有很好的互补性，原发性肝癌诊疗规范(2017年版)也将这两个生物标志物纳入诊疗规范中。

为了解决检测小的肝癌病灶和提高对MVI检出率。我们先前工作的基础上，制备出原发性肝癌MR双靶点(AFP和GPC3)特异性分子探针。

发明内容

针对相关技术中的上述技术问题，本发明提出一种对原发性肝癌MR双靶点特异性分子探针及其制备方法。

为实现上述技术目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种原发性肝癌MR双靶点特异性分子探针，包括载体，所述载体末端分别连接有两种能够与原发肝癌细胞特异性结合抗体：Anti-AFP和Anti-GPC3。

其中，所述载体为MR非特异性对比剂，所述载体选自超顺磁性氧化铁(SPIO)或超小超顺磁性氧化铁(USPIO)。对所述载体末端修饰后增加羧基，通过所述羧基分别连接Anti-AFP和Anti-GPC3。

进一步的，Anti-AFP与所述载体连接的分子数量多于Anti-GPC3与所述载体连接的分子数量，Anti-AFP与Anti-GPC3优选比例为3：2或3：1。

本发明提供一种原发性肝癌MR双靶点特异性分子探针，其分子结构如下所示：

本发明还提供一种原发性肝癌MR双靶点特异性分子探针的制备方法，采用一锅法制备，具体包括以下步骤：

S1选择载体，所述载体为超顺磁性氧化铁SPIO或超小超顺磁性氧化铁USPIO，对其末端修饰后增加羧基；

S2利用羧基连接两个能够与原发肝癌细胞特异性结合抗体：Anti-AFP和Anti-GPC3；

S3采用离心机离心方法或磁性分离方法分离最后产物。