[发明专利]一种胎儿纤维连接蛋白荧光免疫层析试条及其制备方法在审
申请号: | 201711332724.6 | 申请日: | 2017-12-13 |
公开(公告)号: | CN108089009A | 公开(公告)日: | 2018-05-29 |
发明(设计)人: | 陈建国;贾志娟;姜海燕;张长弓;杜民 | 申请(专利权)人: | 福州大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/558;G01N33/52 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350108 福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胎儿纤维连接蛋白 单克隆抗体 荧光免疫层析 荧光标记 反应膜 包被 试条 鼠抗 制备 底板 高灵敏度 快速定量 检测区 结合垫 结合体 试纸条 鼠抗兔 吸收垫 样品垫 质控区 兔IgG 床边 抗体 检测 | ||
1.一种胎儿纤维连接蛋白荧光免疫层析试条,其特征在于:所述试纸条包括底板、反应膜、样品垫、结合垫和吸收垫;所述结合垫包被有荧光标记的胎儿纤维连接蛋白单克隆抗体和荧光标记的兔IgG;所述反应膜具有一条T线检测区及C线质控区,包被的抗体分别为鼠抗ffn单克隆抗体与鼠抗兔IgG 单克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的一种胎儿纤维连接蛋白荧光免疫层析试条,其特征在于:所述荧光标记的标记荧光素为水溶性带有羧基的ZnS/CdSe量子点。
3.根据权利要求1所述的一种胎儿纤维连接蛋白荧光免疫层析试条,其特征在于:所述反应膜为硝酸纤维素膜。
4.根据权利要求1所述的一种胎儿纤维连接蛋白荧光免疫层析试条,其特征在于:所述结合垫为聚酯膜。
5.如权利要求1所述的一种胎儿纤维连接蛋白荧光免疫层析试条的制备方法,其特征在于:其包括如下步骤 :
1)包被:用pH7.4 10mM PBS将鼠抗fFn单克隆抗体与鼠抗兔IgG分别稀释至2.0mg/mL、1.5mg/mL,分别包被在T线检测区及C线检测区,37℃烘干5h;其中T线检测区及C线检测区间隔为4.5mm;
2)标记:将水溶性带有羧基的ZnS/CdSe量子点、鼠抗fFn单克隆抗体按3:1的质量比混合于10mM、pH7.4磷酸缓冲液,涡旋仪上低速混匀,然后加入终浓度均为5ug/mL的EDC、NHS溶液,涡旋混匀后,37℃摇床中反应4h;反应完成后,采用离心分离进行纯化,用PBS缓冲液至少清洗三次以除去游离的抗体,最后产物分散在含1%BSA的PBS缓冲液中;按照3ul/cm喷在结合垫聚酯膜上,37℃烘干3h;
3)组装:将结合垫、样品垫按顺序贴在硝酸纤维素膜上,最后在硝酸纤维素膜的另一端贴上吸收垫,各个垫与膜之间相互重叠1-2mm,试纸条组装完成;用切条机将完成组装的试纸条进行切割,宽度为4mm,并将其装入塑料卡中,并将试纸条与干燥剂一起装入铝箔袋内密封储存。
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