[发明专利]抗H7N9全人源单克隆抗体8E17及其制法与应用

说明书

本发明是关于抗H7N9全人源单克隆抗体8E17及其制法与应用，抗H7N9全人源单克隆抗体8E17或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合H7N9的生物活性片段，其中，所述抗体具有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区各自具有3个互补决定区(CDR)。本发明所述抗体8E17可靶向结合H7N9病毒的血凝素HA，可应用于流感病人病毒检测用。

技术领域

本发明是关于一种抗H7N9全人源单克隆抗体及其制备方法与应用，具体地说，是关于抗H7N9全人源单克隆抗体8E17及其制法与应用，属于免疫学技术领域。

背景技术

在2015年全球十大畅销药中，有六个是全人源或人源化单克隆抗体药物。排名第一的是艾伯维公司治疗关节炎的抗TNFa单克隆抗体Humira，这是一个全人源单克隆抗体，已经是连续3年销售额100亿以上的药王。从1986年第一个单克隆抗体药物上市开始，单抗药物经历了鼠源单抗药物(Orthoclone OKT3)、嵌合单抗药物(Rituximab)、人源化单抗药物(Herceptin)和全人源单抗药物(Humira)等阶段。由于人体出现抗鼠抗体反应(HAMA)，鼠源单抗药物、嵌合单抗药物已经逐渐被淘汰，目前占据市场的单克隆抗体药物全都是人源化单克隆抗体药物。与国际先进的人源抗体生产技术相比，深圳乃至全中国都有很大差距，主要表现在人源抗体药物领域的创新能力薄弱，自主研发的品种少，目前还没有原创人源化单克隆抗体药物上市的报道，庞大的抗体药物市场被国外药企占领。我国要改变落后局面，争夺消费潜力巨大的国内外抗体药物市场，亟需攻克人源化单克隆抗体技术。

人源抗体指的是抗体基因序列完全来源于人抗体基因序列。人源抗体特异性高，副作用少，防治疾病效果好，是今后单抗药物的主要发展方向。目前常见的制备人源单克隆抗体技术主要有噬菌体展示技术和单个B细胞PCR技术。噬菌体展示技术制备人源单克隆抗体具有生产成本低、不经过免疫和细胞融合等繁琐工作的优点。但是其缺点也比较明显，从非免疫抗体库中获得的抗体往往亲和力不足、受外源基因转化率的限制、抗体库的库容量不足以涵盖动物的抗体多样性等。而近年来新兴的单个B细胞PCR技术指的是从病人的血液中分离分泌功能抗体的B细胞，然后提取RNA和合成cDNA，从中克隆分泌目的抗体的基因，最后重组和表达全人源单克隆抗体。该技术操作简单快捷，生产的人源抗体具有高亲和力和特异性，而近来改进的从记忆B细胞中分离具有中和病毒功能或杀伤肿瘤功能的单克隆抗体技术，更是大大减少了繁琐操作和成本。单个B细胞制备人源化单克隆抗体技术是研发人源单克隆抗体的发展趋势。

人源单克隆抗体在治疗炎症、癌症特别是流行性感冒方面具有高特异性的显著疗效。流行性感冒是由流感病毒引起的传染性疾病，严重威胁人类健康。全球每年约有10亿人受季节性流感病毒感染，其中有25-50万人死亡。H7N9病毒是一种流感病毒，对传统的抗病毒药amantadine和rimantadine有耐药性，目前尚没有有效治疗手段。H7N9病毒在入侵细胞时需要依赖病毒自身表达的特定分子与人细胞上的受体结合，才能感染细胞，并进一步扩增。中和病毒的人源抗体是人B淋巴细胞产生的某些特异抗体，能够与病毒表面的抗原结合，从而阻止该病毒黏附靶细胞受体，防止病毒侵入细胞，能够高效防治H7N9流行性感冒。

因此，提供抗H7N9全人源单克隆抗体及其制法具有重大意义。

发明内容

本发明的目的之一在于提供抗H7N9全人源单克隆抗体8E17或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合H7N9的生物活性片段。

本发明的另一目的在于提供编码所述抗H7N9全人源单克隆抗体8E17或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合H7N9的生物活性片段的基因及含该基因的载体或细胞。

本发明的另一目在于提供产生所述抗H7N9全人源单克隆抗体8E17的方法。

本发明的另一目在于提供包所述的抗H7N9全人源单克隆抗体8E17或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合H7N9的生物活性片段的药物组合物。