[发明专利]一种柏子仁药材UPLC特征图谱的构建及其检测方法

说明书

本发明公开了一种柏子仁药材UPLC特征图谱的构建及其检测方法，本发明针对柏子仁药材存在的质量控制问题，建立了柏子仁药材的UPLC特征图谱，同时采用UPLC‑MS进行相关物质基础研究的确认，标定了7个特征峰，采用本发明建立的柏子仁药材的UPLC特征图谱，可充分展示柏子仁药材的化学成分的特征，特征峰信息量丰富，该方法重现性良好，准确可靠，通过所建立的UPLC特征图谱可以实现对柏子仁药材及相关伪品全面而有效的鉴别。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种柏子仁药材特征图谱的构建及其检测方法。

背景技术

柏子仁为柏科植物侧柏Platycladis orientalis(L.)Franco的干燥成熟种仁。味甘，平。具有养心安神，润肠通便，止汗。柏子仁始载于《神农本草经》,列为上品,是临床上常用中药之一。它具有养心安神、止汗、润肠的功能,用于治疗虚烦失眠、心悸怔忡、阴虚盗汗、肠燥便秘等症。

目前柏子仁货源较为紧缺，一些不法商家将长糯米、籼米和柏子仁混合在一起，有些不法商人利用柏子仁较小、易碎的特点，把碎粳米和柏子仁混合一起炒，使粳米和柏子仁色泽一致，难以区分。有的在柏子仁中掺混入黄砂粒以增重，目前柏子仁掺伪的比例越来越大。

《中国药典》2015年版柏子仁药材只有显微鉴别项，不能全面地评价质量。国内外参考文献关于柏子仁的质量研究和鉴别均较少。目前还没有文献报道柏子仁指纹/特征图谱技术研究，现有标准和方法不能对柏子仁药材的质量进行有效的鉴别。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种柏子仁药材UPLC特征图谱的构建方法，该方法重现性良好，准确可靠，通过所建立的UPLC特征图谱可以实现对柏子仁药材及相关伪品全面而有效的鉴别。

本发明是通过以下技术方案实现：

一种柏子仁药材UPLC特征图谱的构建方法，包括如下步骤：

(a)参照物溶液的制备：分别取色氨酸对照品和儿茶素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得；

(b)供试品溶液的制备：将本品粉末过二号筛，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50-70％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理20-40分钟，放冷，再称定重量，用50-70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(c)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温为30℃；流速为0.4ml/min；检测波长为210nm；理论板数按色氨酸峰计算应不低于5000；

(d)对照特征图谱的建立：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入超高效液相色谱仪，测定，采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”，建立柏子仁药材对照特征图谱，确定具有7个特征峰，其中峰3为色氨酸、峰4为儿茶素；以峰3色氨酸峰为参照峰S峰，各特征峰的相对保留时间分别为：峰1为0.732、峰2为0.788、峰5为3.017、峰6为3.097、峰7为3.145，相对保留时间在规定值的±5％之内。

优选的，所述(b)中，供试品溶液的制备为：将本品粉末过二号筛，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

优选的，所述(c)中选用Waters Cortecs T3色谱柱，柱长为100nm，内径为2.1mm，粒径为1.6μm。