[发明专利]一种利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法在审

专利信息
申请号: 201711350508.4 申请日: 2017-12-15
公开(公告)号: CN108048397A 公开(公告)日: 2018-05-18
发明(设计)人: 贺盛;唐正晓;张振;杨学文;吴忠坤 申请(专利权)人: 海南博鳌银丰康养国际医院有限公司;银丰生物工程集团有限公司
主分类号: C12N5/0783 分类号: C12N5/0783
代理公司: 山东舜天律师事务所 37226 代理人: 李新海
地址: 571434 海南省*** 国省代码: 海南;46
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摘要:
搜索关键词: 一种 利用 靶向 pd 抗体 沉默 免疫 细胞 调控 受体 方法
【权利要求书】:

1.一种利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法,其特征在于:包括以下步骤:

(1)分离:取抗凝处理的血液,离心,得到上层血浆层、中间细胞层和下层红细胞层,吸取血浆、白细胞和血小板,去掉红细胞层,得血浆和白细胞的混合物;

(2)共浴:将PD-1单抗,与上述得到的血浆和白细胞的混合物共浴,共浴条件为:5%CO2,37℃,60min;PD-1单抗的用量为:每1ml血浆和白细胞的混合物加入2μgPD-1单抗;共浴后,内毒素检测,若呈阳性,过100目筛,得PD-1抗体处理后的白细胞制品。

2.根据权利要求1所述的利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法,其特征在于:所述步骤(1)中,离心的参数为:2600rpm,离心10min。

3.根据权利要求1所述的利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法,其特征在于:所述步骤(1)中,所述血浆和白细胞的混合物,每1ml含2×106的白细胞。

4.根据权利要求1所述的利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法,其特征在于:所述步骤(1)的具体操作方式为:取抗凝处理的血液,加入到50ml离心管中,2600rpm离心10min,吸取中间细胞层并将其转移至新的离心管中,再次重复两次离心操作,吸取中间细胞层,与血浆混合,得血浆和白细胞的混合物。

5.根据权利要求1或4所述的利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法,其特征在于:所述抗凝处理的血液,通过以下方法采集得到:用含有枸橼酸钠抗凝剂的采血袋采集120mL外周血,保存在4~8℃的环境下。

6.权利要求1~5中任一项所述的利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法制备得到的白细胞制品。

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