[发明专利]一种检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条及其制备、使用方法

权利要求书

1.一种检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条，其特征在于：包括PVC底板及结合在PVC底板至少一表面中段的硝酸纤维素膜，设置在所述PVC底板至少一表面的一端、且与所述硝酸纤维素膜邻接的吸水滤纸，设置在所述PVC底板至少一表面的另一端、且与所述硝酸纤维素膜邻接的结合垫，以及设置在远离所述硝酸纤维素膜的一端、且与所述结合垫邻接的样品垫；其中，所述硝酸纤维素膜分别在临近结合垫和吸水滤纸处设有检测线和质控线；所述检测线包被有沙门氏菌单克隆抗体SP1；所述质控线包被有羊抗兔IgG抗体；所述结合垫包被有胶体金标记的沙门氏菌多单克隆抗体DSP1。

2.如权利要求1所述的检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条，其特征在于：所述检测线包被有沙门氏菌多单克隆抗体DSP1；所述质控线包被有羊抗兔IgG抗体；所述结合垫包被有胶体金标记的沙门氏菌单克隆抗体SP1。

3.如权利要求1所述的检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条，其特征在于：所述吸水滤纸邻近所述硝酸纤维素膜的一端叠合设置在所述硝酸纤维素膜表面；和/或

所述结合垫邻近所述硝酸纤维素膜的一端叠合设置在所述硝酸纤维素膜表面；和/或

所述样品垫邻近所述结合垫的一端叠合设置在所述结合垫表面。

4.如权利要求1-3任一项所述的检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

a.利用氯金酸溶液和柠檬酸钠溶液制备胶体金，得到胶体金溶液；

b.在碱性条件下，向所述胶体金溶液中加入沙门氏菌多单克隆抗体DSP1进行标记处理，经封闭处理、离心、重悬，得到胶体金标记的沙门氏菌多单克隆抗体DSP1；

c.将玻璃纤维素膜置于结合垫处理液中浸泡处理，制备金标垫；用胶体金标记的沙门氏菌多单克隆抗体DSP1对所述金标垫进行喷金处理后，干燥后得到结合垫；

d.取沙门氏菌单克隆抗体SP1、羊抗兔IgG抗体，采用划膜仪分别划至硝酸纤维素膜的检测线、质控线的位置；

e.将玻璃纤维素膜置于样品垫处理液中浸泡处理，干燥后得到样品垫；

f.将吸水滤纸贴于PVC底板上，且所述吸水滤纸的一端叠合在所述硝酸纤维素膜的一端表面；将结合垫的一端叠合在所述硝酸纤维素膜的另一端表面；将样本垫的一端叠合在所述结合垫的另一端表面，进行切割处理，得到检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条。

5.如权利要求4所述的检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条的制备方法，其特征在于：步骤c、e中，所述浸泡处理的时间为10-60s；和/或

步骤c、e中，所述干燥的的时间为12-18h；和/或

步骤c中，干燥的条件为温度36-38℃，湿度10％-30％；和/或

步骤e中，干燥的条件为温度36-38℃。

6.如权利要求4所述的检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条的制备方法，其特征在于：所述胶体金溶液的制备方法为：量取纯化水装入锥形瓶中，加热至340℃，搅拌至沸腾，加入浓度为1％的氯金酸，加热并快速加入等体积的浓度为2％的柠檬酸钠，继续加热，液体颜色稳定为酒红色，室温冷却，得到粒径为35-45nm的胶体金溶液。

7.如权利要求4所述的检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条的制备方法，其特征在于：所述胶体金标记的沙门氏菌多单克隆抗体DSP1的标记方法为：量取10mL胶体金溶液，加入0.2M的K₂CO₃溶液，至pH为8.2±0.05，放置在速度为70-90rpm的摇床上3-5min，加入150μg沙门氏菌多单克隆抗体DSP1，进行标记处理25-35min，加入100Μ的10％的BSA溶液，进行封闭处理25-35min，15000rpm、4℃离心10-15min，弃上清液，沉淀用600μL金标重悬液重悬，得到胶体金标记的沙门氏菌多单克隆抗体DSP1，2-8℃备用。