[发明专利]一种检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条及其制备、使用方法

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体公开一种检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条及其制备、使用方法。所述试纸条，包括PVC底板及结合在PVC底板至少一表面中段的硝酸纤维素膜，设置在所述PVC底板至少一表面的一端、且与所述硝酸纤维素膜邻接的吸水滤纸，设置在所述PVC底板至少一表面的另一端、且与所述硝酸纤维素膜邻接的结合垫，以及设置在远离所述硝酸纤维素膜的一端、且与所述结合垫邻接的样品垫；其中，所述硝酸纤维素膜分别在临近结合垫和吸水滤纸处设有检测线和质控线。本发明提供的试纸条能够快速、简便、广谱地检测多个血清群的沙门氏菌，从而能够方便快捷地检测食品中可能污染的沙门氏菌。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条及其制备、使用方法。

背景技术

沙门氏菌是最大群肠道性致病菌,主要寄存在畜禽体内和蛋类中,具有繁殖速度快,生存能力强等特点。沙门氏菌致病物质有菌毛、菌体(O)抗原、内毒素和肠毒素。菌毛和O抗原与其侵袭力有关，内毒素导致肠道局部炎症反应和全身性中毒症状，部分沙门氏菌可产生霍乱样肠毒素，导致严重的腹泻。沙门氏菌具有传染性,容易引起群发性感染,造成严重的后果。有报导表明,人的大多数沙门氏菌感染直接或间接地与动物性食品有关,在世界各国各类细菌性的食物中毒中,沙门氏菌食物中毒位居前列。

根据O抗原可将沙门氏菌分为若干个O群，根据O和H抗原的不同组合，可将沙门氏菌划分为许多血清型，迄今世界上已鉴定出2500多个不同的沙门氏菌血清型。为了有效控制沙门氏菌病的传播,就必须有快速和可靠的方法来检测食物及环境中的沙门氏菌。

传统的食品中检测沙门氏菌的方法主要是用培养法，繁琐、费时，且存在阳性率相对偏低，不能早期诊断的缺陷。目前应用于检测沙门氏菌的方法有化学发光法、免疫分析方法、免疫层析法、免疫比浊法、酶联免疫吸附法以及聚合酶链反应(PCR)技术等，可归纳为以下几类：

化学发光免疫分析方法(CLA)：它是一种测量超微量活性物质(包括药物、毒物、微生物、激素、蛋白质)的技术，是将免疫反应与发光测定结合起来的分析方法，更灵敏，更为准确，但化学发光免疫分析需要专门的设备，测试成本高。

酶联免疫吸附法(ELISA)：它是继免疫萤光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术，敏感性很高，稳定性好，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域，目前主要用直接EIA法与夹心ELISA法对仓品中沙门氏菌的检测，但是elisa检测法时间长，操作复杂。还需配备相应设备，需要实验室里进行操作，不满足快检要求。

免疫比浊法：适用于自动化分析，但要有专门的仪器，且要求反应在10分钟内完成，必须有高活性的抗体和合适的反应体系。此法检测血清用量大且易受到脂血的影响。

聚合酶链反应(PCR)：具有简便、快速、敏感性高和特异性强的优点,已广泛应用于微生物检测、遗传病诊断等诸多领域，但其会引起的实验室环境的污染和使用的染色剂具有致癌性等影响。

发明内容

针对现有的检测沙门氏菌的方法存在的操作复杂，检测费时，对设备要求高等问题，本发明提供一种检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条及其制备方法。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种检测食品中广谱型沙门氏菌的试纸条，包括PVC底板及结合在PVC底板至少一表面中部的硝酸纤维素膜，设置在所述PVC底板至少一表面的一端、且与所述硝酸纤维素膜邻接的吸水滤纸，设置在所述PVC底板至少一表面的另一端、且与所述硝酸纤维素膜邻接的结合垫，以及与所述结合垫邻接、且设置在远离所述硝酸纤维素膜一端的样品垫；其中，所述硝酸纤维素膜分别在临近结合垫和吸水滤纸处设有检测线和质控线；所述检测线包被有沙门氏菌单克隆抗体SP1；所述质控线包被有羊抗兔IgG抗体；所述结合垫包被有胶体金标记的沙门氏菌多单克隆抗体DSP1。