[发明专利]一种黄参粗多糖的脱蛋白方法在审
申请号: | 201711352286.X | 申请日: | 2017-12-15 |
公开(公告)号: | CN109929045A | 公开(公告)日: | 2019-06-25 |
发明(设计)人: | 于李佳 | 申请(专利权)人: | 卓爱普科技(北京)有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K31/715;A61P9/12;A61P3/06 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人: | 王玉松 |
地址: | 100041 北京市石*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 粗多糖 上清液 脱蛋白 沉淀 损失率 磺胺二甲基嘧啶 粗多糖浓缩液 多糖溶液 常温下 澄清剂 酶解剂 提取液 灭酶 盐酸 制备 | ||
本发明提供了一种黄参粗多糖的脱蛋白方法。该方法包括以下步骤:1)提取黄参粗多糖提取液;2)黄参粗多糖脱蛋白:在步骤1)提取的黄参粗多糖浓缩液中加入酶解剂混合均匀,在转速为400‑500r/min、温度为50‑60℃的条件下搅拌20‑30min,灭酶,离心,得A上清液和A沉淀,在A上清液中加入15‑25mg/mL的磺胺二甲基嘧啶混合均匀,在常温下反应3‑5min,离心,得B上清液和B沉淀,在A沉淀中加入澄清剂,用NaOH和盐酸调节pH至7‑7.5,在50‑70℃条件下搅拌1‑1.5h,转速为1000‑2000r/min,离心,得C上清液和C沉淀,将B上清液和C上清液混合,即得黄参脱蛋白多糖溶液;本发明通过以上方法制备的黄参脱蛋白多糖,能够显著的提高黄参粗多糖脱蛋白的效果,降低黄参粗多糖的损失率。
技术领域
本发明涉及生物工程技术领域,特别涉及一种黄参粗多糖的脱蛋白方法。
背景技术
黄参为伞形科迷果芹属迷果芹植物的根及根状茎,广泛分布于我国西北及东北等地的高寒阴湿处,它的肉质直根富含人体必需的16种氨基酸、矿物质和钙、磷、铁、锌等微量元素,是一种经济、药用价值极高、纯天然的绿色保健食品,对胃气虚寒、神疲乏力、气血失调、儿童发育迟缓、营养不良、挑食厌食等效果俱佳,被誉为小人参,黄参粗多糖中含有大量的杂质,如蛋白质、鞣质和淀粉等,在黄参粗多糖提取液中,蛋白质占了很大的比例,目前常用的黄参粗多糖除蛋白的方法主要有:sevag法、TCA-sevag法和链霉菌蛋白酶-sevag法,但使用这三种脱蛋白的方法去除黄参粗多糖中的蛋白时,往往会损失大量的多糖成分,同时,黄参粗多糖中的淀粉、无机盐和鞣质等其他的杂质较难去除,导致黄参多糖的纯度低,质量差,疗效差,如何在黄参粗多糖中脱去大部分的蛋白质的同时降低黄参多糖的损失率,并去除黄参粗多糖中的其他杂质一直是黄参多糖分离纯化的一个难题。
发明内容
为了解决现有技术中黄参脱蛋白效果差和黄参多糖损失率高等问题,本发明提供了一种黄参粗多糖的脱蛋白方法,采用该方法,可在高效率的脱去黄参多糖中的蛋白的同时,显著的降低黄参多糖的损失率,还可以同时脱去黄参粗多糖中的无机盐、淀粉和鞣质等杂质。
本发明提供了一种黄参粗多糖的脱蛋白方法,该方法包括以下步骤:
1)提取黄参粗多糖提取液;
2)黄参粗多糖脱蛋白:在步骤1)提取的黄参粗多糖浓缩液中加入酶解剂混合均匀,在转速为400-500r/min、温度为50-60℃的条件下搅拌20-30min,灭酶,离心,得A上清液和A沉淀,在A上清液中加入15-25mg/mL的磺胺二甲基嘧啶混合均匀,在常温下反应3-5min,离心,得B上清液和B沉淀,在A沉淀中加入澄清剂,用NaOH和盐酸调节pH至7-7.5,在50-70℃条件下搅拌1-1.5h,转速为1000-2000r/min,离心,得C上清液和C沉淀,将B上清液和C上清液混合,即得黄参脱蛋白多糖溶液。
本发明通过步骤2)对黄参粗多糖进行脱蛋白处理,能够高效的脱去黄参粗多糖中的蛋白质,同时降低黄参多糖的损失率。
进一步改进,步骤2)所述酶解剂由质量比为3:0.5-1.5的链霉菌蛋白酶和α淀粉酶混合构成的的混合酶,每毫升的黄参粗多糖浓缩液中添加5-10毫克的混合酶,所述澄清剂为ZTC-ⅡB型澄清剂,每毫克A沉淀中添加0.05-0.1毫升的ZTC-ⅡB型澄清剂。
进一步改进,步骤1)黄参粗多糖提取液的提取方法包括如下步骤:
S1:将黄参粉碎成粉末,过60目筛,按照40-50mL/g浓度加入蒸馏水,放置于匀浆机中搅拌均匀,得黄参匀浆;
S2:在S1所得的黄参匀浆中加入40-50倍量的蒸馏水微波提取30-40min,过滤,得滤渣和微波提取液;其中,微波功率为375-400W;
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