[发明专利]阳离子脂质体/基因复合物解离动力学检测方法在审
| 申请号： | 201711358084.6 | 申请日： | 2017-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN108169195A | 公开（公告）日： | 2018-06-15 |
| 发明（设计）人： | 张树彪;赵轶男;朴永哲;海华;许晓东 | 申请（专利权）人： | 大连民族大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 21235 | 代理人： | 祝诗洋 |
| 地址： | 116600 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 阳离子脂质体 解离 基因复合物 细胞 琼脂糖凝胶电泳技术 荧光光谱技术 动力学检测 荧光共振能量转移 动力学过程 动力学曲线 非线性方程 机制研究 介导基因 理论基础 应用研究 荧光染料 动力学 复合物 正电荷 递送 基因 检测 拟合 定性 申请 应用 分析 研究 | ||
1.阳离子脂质体/基因复合物解离动力学检测方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)阳离子脂质体与基因按照质量比6：1～1：1制备阳离子脂质体/基因复合物，加入竞争性结合剂与基因竞争性结合阳离子脂质体，采用琼脂糖凝胶电泳检测阳离子脂质体/基因复合物解离0～48h基因从复合物中的释放情况，分析阳离子脂质体解离基因的量；
(2)根据步骤(1)制备阳离子脂质体/基因复合物，加入荧光染料与阳离子脂质体竞争性结合基因，建立荧光共振能量转移体系，使基因从复合物中解离，荧光染料与基因的质量比1:1～24:1，解离0～48h，采用荧光光谱测量基因从复合物释放不同时间后的发光强度；发光强度的检测条件为：激发波长260nm，发射波长600nm，激发狭缝为1nm，发射狭缝为0.8nm，扫描范围为550-750nm。
2.根据权利要求1所述的阳离子脂质体/基因复合物解离动力学检测方法，其特征在于，所述阳离子脂质体为氨基酸型阳离子脂质体、肽型阳离子脂质体、单价季铵盐阳离子脂质体和双子型季铵盐阳离子脂质体。
3.根据权利要求1所述的阳离子脂质体/基因复合物解离动力学检测方法，其特征在于，所述基因包括质粒DNA、siRNA。
4.根据权利要求1所述的阳离子脂质体/基因复合物解离动力学检测方法，其特征在于，所述荧光染料为有机染料分子和溴化乙锭。
5.根据权利要求1所述的阳离子脂质体/基因复合物解离动力学检测方法，其特征在于，所述的竞争性结合剂为肝素钠或血清。
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