[发明专利]IDH1/2基因突变检测体系及其试剂盒

权利要求书

1.一种IDH1/2基因突变检测体系，其特征在于：包括用于检测IDH1/2基因第394密码子C394T位点和第395密码子G395A位点的上下游引物A，用于检测IDH1/2基因第419密码子G419A位点的上下游引物B，用于检测IDH1/2基因第515密码子G515A位点的上下游引物C，荧光染料SYBR Green ，以及肽核酸；

所述上游引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

所述上游引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述下游引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；

所述上游引物C的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，所述下游引物C的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；

所述肽核酸包括核苷酸序列与IDH1/2野生型基因第394密码子C394T位点和野生型第395密码子G395A位点完全互补且核苷酸序列如SEQ ID No.7所示的肽核酸A，核苷酸序列与IDH1/2野生型基因第419密码子G419A位点完全互补且核苷酸序列如SEQ ID No.8所示的肽核酸B，核苷酸序列与IDH1/2野生型基因第515密码子G515A位点完全互补且核苷酸序列如SEQ ID No.9所示的肽核酸C。

2.根据权利要求1所述的IDH1/2基因突变检测体系，其特征在于：所述上下游引物进行了LNA修饰。

3.根据权利要求1所述的IDH1/2基因突变检测体系，其特征在于：所述上下游引物在反应体系中的最终浓度均为0.1～0.3μM/L。

4.根据权利要求3所述的IDH1/2基因突变检测体系，其特征在于：所述上下游引物A在反应体系中的最终浓度为0.19μM/L，所述上下游引物B在反应体系中的最终浓度为0.2μM/L，所述上下游引物C在反应体系中的最终浓度为0.15μM/L。

5.根据权利要求1所述的IDH1/2基因突变检测体系，其特征在于：所述肽核酸在反应体系中的最终浓度均为1～1.5μM/L。

6.根据权利要求5所述的IDH1/2基因突变检测体系，其特征在于：所述肽核酸A、B、C在反应体系中的最终浓度均为1.25μM/L。

7.一种采用如权利要求1所述的检测体系的IDH1/2基因突变检测产品。

8.一种IDH1/2基因突变检测试剂盒，其特征在于：包括PCR检测液A、PCR检测液B、PCR检测液C和SYBR Green混合液；

所述PCR检测液A包括用于检测IDH1/2基因第394密码子C394T位点和野生型第395密码子G395A位点的上下游引物A和肽核酸A，PCR检测液B包括用于检测IDH1/2基因第419密码子G419A位点的上下游引物B和肽核酸B，PCR检测液C包括用于检测IDH1/2基因第515密码子G515A位点的上下游引物C和肽核酸C；

所述上游引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

所述上游引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述下游引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；

所述上游引物C的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，所述下游引物C的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；

所述肽核酸包括核苷酸序列与IDH1/2野生型基因第394密码子C394T位点和野生型第395密码子G395A位点完全互补且核苷酸序列如SEQ ID No.7所示的肽核酸A，核苷酸序列与IDH1/2野生型基因第419密码子G419A位点完全互补且核苷酸序列如SEQ ID No.8所示的肽核酸B，核苷酸序列与IDH1/2野生型基因第515密码子G515A位点完全互补且核苷酸序列如SEQ ID No.9所示的肽核酸C。

9.根据权利要求8所述的IDH1/2基因突变检测试剂盒，其特征在于：所述上下游引物进行了LNA修饰；所述上下游引物在反应体系中的最终浓度均为0.1～0.3μM/L；所述肽核酸在反应体系中的最终浓度均为1～1.5μM/L。

10.根据权利要求8所述的IDH1/2基因突变检测试剂盒，其特征在于：还包括阳性对照P1、阳性对照P2和阴性对照；

所述阳性对照液P1是浓度为100ng/μL的包含IDH1/2基因C394T、G395A、G419A、G515A位点的野生型质粒溶液；

所述阳性对照液P2是浓度为100ng/μL的包含IDH1/2基因C394T、G395A、G419A、G515A位点的突变型质粒溶液；

所述阴性对照液是不含IDH1/2基因的基因组DNA溶液。