[发明专利]一种测定益母草中盐酸水苏碱含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学检测领域，尤其是一种测定益母草中盐酸水苏碱含量的方法。

背景技术

益母草唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的新鲜或干燥地上部分，别名茺蔚、坤草。性微寒，味苦辛，可去瘀生新，活血调经，利尿消肿，是历代医家用来治疗妇科疾病之要药。现代医学研究证明，益母草含益母草全草含益母草碱，水苏碱，芦丁，延胡索酸，益母草碱甲和益母草碱乙，水苏糖，植物甾醇，树脂，脂肪油，月桂酸，亚油酸，β-亚油酸及油酸。

据现代临床及动物实施证明，益母草浸膏及煎剂对子宫有强而持久的兴奋作用，不但能增强其收缩力，同时能提高其紧张度和收缩率。

水苏碱是益母草中的指标性含量，也是鉴定益母草优劣的标准。《药典2005》对水苏碱的提取方法为：取本品粉末(过三号筛)约l g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％75％甲醇25ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用70％75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。并对水苏碱含量有明确规定不得少于0.5％。

水苏碱分子式：C₇H₁₃NO₂，分子量：179.5。又称L-水苏碱。其一水合物，易潮解的结晶，稍有甜味。旋光度-40.25°(c＝4，水)。其无水物熔点235℃，在熔点状态下异构化为古液酸甲酯。溶于水、75％甲醇、稀酸，不溶于乙醚、氯仿。其盐酸盐，大棱柱状结晶(无水75％甲醇)，分解点235℃，易溶于水；溶于13份75％甲醇。天然存在于唇形科植物益母草的叶等植物中。有活血调经，利尿消肿，收缩子宫的作用。对肾上腺素所引起心肌缺血有提高冠状动脉和心肌营养性血流量、减少心肌细胞坏死量、降低血黏度、降低血管阻力、改善微循环、减慢心率、减少心输出量及抗血小板凝聚等作用(有望成为良好的心血管系统疾病的治疗药物)；还可改善和增加肾脏的血流量，使肾小球和肾小管得到修良、恢复肾功能的作用。对子宫有引起节律性收缩和兴奋子宫的作用，能抑制乳腺癌和子宫肌腺病的发生；具有祛痰、镇咳、松弛支气管平滑肌的作用。

现有从益母草中提取水苏碱工艺，多是水回流提取醇沉、75％甲醇提取及其超声微波辅助，再树脂吸附。但所得盐酸水苏碱含量低，总生物碱收率低，能耗大且耗时久。

因此开发出一种简便、快捷、准确的提取以及测定益母草中盐酸水苏碱的方法很有必要。

发明内容

针对上述不足，本发明旨在提供一种简便、快捷、准确的ASE法提取益母草中盐酸水苏碱的方法，同时采用HPLC法对盐酸水苏碱的含量进行测定。

为了实现上述技术效果，本发明提供的技术方案是这样的：一种测定益母草中盐酸水苏碱含量的方法，依次包括下述步骤：

步骤1：采用ASE萃取法用75％甲醇萃取粉碎后的益母草样品，并收集75％甲醇萃取液；

步骤2：采用HPLC法对75％甲醇萃取液中的盐酸水苏碱的含量进行测定。

进一步的，所述的步骤1依次包括下述子步骤：

步骤S1：将益母草样品粉碎，过筛，与硅藻土按1：1混合均匀；

步骤S2：将步骤1所得混合物装于放有滤膜的ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；

步骤S3：用75％甲醇萃取，收集萃取液，用75％甲醇定容至25ml；

步骤S4：取1ml步骤3所得萃取液装于放有GCB的离心管中，离心，取上清液，即得。

进一步的，所述的步骤S1具体为：将益母草样品粉碎，过三号筛，取1g与1g硅藻土混合均匀。

进一步的，所述的步骤S2具体为：将步骤1所得混合物装于放有玻璃纤维滤膜的10ml ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行。

进一步的，所述的步骤S4具体为：取1ml步骤3所得萃取液装于放有100mg GCB的离心管中，漩涡1min，在15000r/min下离心3min，取上清液，即得。

进一步的，步骤S3所述的萃取，参数如下：萃取温度为120℃，萃取时间为5min，萃取次数为1次，压力为1500psi，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s。

进一步的，所述的步骤2的HPLC法的检测参数为：色谱柱为Agilent Zorbax HILIC Plus；柱温为40℃；流速为1mL/min；流动相为乙腈-0.2％醋酸；检测波长为277nm；雾化温度为50℃；蒸发温度为50℃。

进一步的，所述的色谱柱的规格为3.5μm，100×4.6mm。