[发明专利]一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法

权利要求书

1.一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于采用分散固相萃取模式，具体步骤如下：

1)将循环肿瘤DNA富集材料装入移液枪枪头或者凝胶上样吸头中，形成微固相萃取柱，采用洗脱液和上样液活化及平衡微固相萃取柱，将生物样品溶解于上样液中，并上到微固相萃取柱上，循环肿瘤DNA富集材料与生物样品的质量比为100～1000:1；

2)采用5-200倍柱体积的淋洗液冲洗萃取柱，淋洗液pH 0-7；

3)采用5-100倍柱体积的洗脱液洗脱得循环肿瘤DNA，洗脱液pH 10-12；

上述整个过程在10-60℃进行；

所述循环肿瘤DNA富集材料为金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒材料；所述金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒材料，其内核为金属纳米颗粒，其外壳的结构式为如下所示：

所述金属为Ag,Ti,Fe,Ga,Ni,Au,Pd或Pt。

2.根据权利要求1所述的一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于所述生物样品为血液、滑膜液、脑脊液或尿液。

3.根据权利要求1所述的一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于所述上样液为有机溶剂、有机酸和水的混合液，有机溶剂为乙腈、甲醇或乙醇；有机酸为甲酸、乙酸或三氟乙酸，所述上样液中有机溶剂体积为10-50％，pH 0-7。

4.根据权利要求1所述的一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于所述洗脱液为有机溶剂、有机酸和水的混合液，有机溶剂为乙腈、甲醇或乙醇；有机酸为甲酸、乙酸或三氟乙酸，所述洗脱液中有机溶剂体积为10-50％，pH 10-12。

5.根据权利要求1所述的一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于：所述淋洗液为有机溶剂、有机酸和水的混合液，有机溶剂为乙腈、甲醇或乙醇；有机酸为甲酸、乙酸或三氟乙酸，所述淋洗液中有机溶剂的体积为0-50％，pH 0-7。