[发明专利]一种测定补骨酯中异补骨酯素含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学检测领域，尤其是一种测定补骨酯中异补骨酯素含量的方法。

背景技术

补骨酯(学名：Psoralea corylifolia Linn.)，又名：破故纸，婆固脂，胡韭子。属蔷薇目，果实入药，具有补益肝肾，健脾益气，涩精止遗的功效，用于肝肾不足，脾气虚弱，面色萎黄，倦怠纳差，腰膝酸痛，遗精梦泄，并可治牛皮癣等皮肤病。

现有技术中没有关于补骨酯中异补骨酯素含量测定的文献报道，为了更好的控制该产品的质量，保证患者服用的药物确实有效，有必要对含量测定方法进行研究。

发明内容

针对上述不足，本发明旨在提供一种测定补骨酯中异补骨酯素有效成分的ASE-HPLC方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供的技术方案是这样的：一种测定补骨酯中异补骨酯素含量的方法，依次包括下述步骤：

步骤1：采用ASE萃取方法用85％乙醇萃取粉碎后的补骨酯，并制备85％乙醇萃取液；

步骤2：采用HPLC法检测85％乙醇萃取液中异补骨酯素、异异补骨酯素的含量。

进一步的，所述的步骤1包括下述子步骤：

步骤S1：将补骨酯样品粉粹，过三号筛，取过筛后的粉末0.5g；

步骤S2：将0.5g补骨酯粉末与0.3g石英砂混合，装于放有滤膜的10mlASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；

步骤S3：用85％乙醇萃取，蒸干，加85％乙醇溶解，并用85％乙醇定容至50ml；

步骤S4：将步骤3所得溶液离心，取上清液，得到85％乙醇萃取液。

进一步的，步骤S3所述的萃取，参数如下：萃取温度为90℃，萃取时间为5min，萃取次数为3次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s，压力为1500psi。

进一步的，步骤S4所述的离心参数为：速度为15000r/min，时间为3min。

进一步的，所述的步骤2的HPLC检测参数为：色谱柱为Thermo Accucore C18；柱温为40℃；流速为0.5mL/min；流动相为体积比为49:51的85％乙醇-水；检测波长：246nm。

进一步的，所述的色谱柱的规格为2.6μm，50mm×2.1mm。

进一步的，所述的萃取方法所采用的仪器为美国DIONEX公司的ASE350快速溶剂萃取仪；所述的HPLC法所采用的仪器为Thermo U3000UHPLC液相色谱仪。

本发明与传统方法相比，具有以下优点：

1.本发明的质量分析方法在色谱条件下检出补骨脂素有效成分，检测方法经过参数的最优化组合，从而使本发明的检测方法灵敏度高，具有很好的分离度，基线稳定，阴性对照无干扰，检测方法的准确性、重现性、线性关系、稳定性均能达到科研和生产的要求；

2.本发明所采用的ASE萃取法提高了温度降低溶剂的黏度，从而减少溶剂进入样品基体的阻止，增加了溶剂进入样品基体的扩散，降低溶剂和样品基体之间的表面张力，使溶剂溶解待测物的容量增加；ASE提取溶剂的选择：

3.本发明曾对快速溶剂萃取使用的溶剂进行考察，《中国药典》使用85％乙醇索氏2h；为了减少杂质，故本实验选用85％乙醇、乙醇、乙腈作为提取溶剂进行了溶剂考察，结果显示85％乙醇与乙醇提取后补骨脂素与异补骨脂素含量与2015年版《中国药典》含量一致，且杂质峰基本相同，故采用与药典一致的提取溶剂85％乙醇；

4.萃取液体的沸点随压力升高而提高，从而使溶剂在高温高压下仍保持在液态(液体对溶质的溶解能力远大于气体对溶质的溶解能力)；故我们选择采用90℃，提取5min，提取3次，即可达到与药典含量接近，更多的提取时间、温度、次数对结果已经无明显影响。

附图说明

图1为异补骨酯素以浓度(mg/ml)-峰面积进行线性回归图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围内所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。

实施例1

1、仪器设备及试剂

1.1仪器：

电子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶剂萃取仪(美国DIONEX公司)、Thermo U3000UHPLC液相色谱仪；

1.2试剂(除特别注明外，本实验所用试剂均为分析纯)：

水：符合GB/T 6682规定的一级水；