[发明专利]高效液相色谱‑蒸发光散射法测定妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及测定妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法，尤其涉及一种高效液相色谱-蒸发光散射法测定妇康宁片中盐酸水苏碱含量的的方法。

背景技术

妇康宁片处方由白芍、益母草、香附等八味中药组成，具有养血理气，活血调经的功效，主治血虚气滞所致的月经不调。方中益母草为中医妇科良药，属唇形科植物益母草(Leonurus iaponicus Houtt.)的新鲜或干燥地上部分，其性微寒，味苦、辛，具有活血调经，利水消肿，清热解毒之功效，用于月经不调，痛经经闭，恶露不尽，水肿尿少，疮肿毒。妇康宁片收载于《中国药典》一部，其质量标准收载了方中君药白芍的含量测定方法，而其臣药益母草只有盐酸水苏碱的薄层鉴别方法。经查阅文献，未见报道测定妇康宁片中盐酸水苏碱的含量方法。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种高效液相色谱-蒸发光散射法测定妇康宁片中盐酸水苏碱含量的的方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种高效液相色谱-蒸发光散射法测定妇康宁片中盐酸水苏碱含量的的方法，包括以下步骤：

(1)制备对照品溶液：取盐酸水苏碱对照品与甲醇制成对照品溶液；

(2)制备待测样品溶液：精密取定妇康宁片样品加甲醇稀释，制得待测样品溶液；

(3)取对照品溶液注入高效液相色谱仪及蒸发光散射检测器测定，建立盐酸水苏碱标准曲线；

(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪及蒸发光散射检测器(ELSD)测定，获得盐酸水苏碱的峰面积，从而根据标准曲线获得盐酸水苏碱含量；

所述步骤(3)和(4)的色谱条件：3.5μm 4.6×100mm,Agilent Zorbax Hilic Plus 100A色谱柱；流动相：甲醇-0.2％冰醋酸＝85:15；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；ELSD检测器参数：雾化器温度65℃，蒸发温度85℃，气体流量1.0L/min，理论板数按盐酸水苏碱峰计不低于10000。

所述步骤(1)中，精密称定盐酸水苏碱对照品17.42mg，至25ml量瓶中，加甲醇稀释至每1ml含盐酸水苏碱0.6940mg的溶液，精密吸取5ml，加甲醇稀释至25ml，得每1ml含盐酸水苏碱0.1388mg的对照品溶液。

所述步骤(2)中，取妇康宁片除去包衣，研细，精密称定2g，置锥形瓶中，精密加入80％乙醇20ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得待测样品溶液。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

与现有技术相比，本发明提供的方法操作简单，高效省时，鉴定结果客观准确。

具体实施方式

实施例1

(1)制备对照品溶液：精密称定盐酸水苏碱对照品17.42mg，至25ml量瓶中，加甲醇稀释至每1ml含盐酸水苏碱0.6940mg的溶液，精密吸取5ml，加甲醇稀释至25ml，得每1ml含盐酸水苏碱0.1388mg的对照品溶液。

(2)制备待测样品溶液：取妇康宁片除去包衣，研细，精密称定2g，置锥形瓶中，精密加入80％乙醇20ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得待测样品溶液。

(3)分别精密吸取对照品溶液4、6、8、10、12μl，注入Agilent 1200高效液相色谱仪及ELSD检测器测定。以峰面积的自然对数为纵坐标Y，以进样量的自然对数为横坐标X，进行线性回归，得到回归方程为Y＝1.6799X+2.0658，r＝0.9997。

色谱柱：3.5μm 4.6×100mm,Agilent Zorbax Hilic Plus 100A色谱柱；流动相：甲醇-0.2％冰醋酸＝85:15；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；ELSD检测器参数：雾化器温度65℃，蒸发温度85℃，气体流量1.0L/min，理论板数按盐酸水苏碱峰计不低于10000。

(4)取待测样品溶液注入Agilent 1200高效液相色谱仪及ELSD检测器进行测定，获得盐酸水苏碱峰面积，根据回归方程计算得到盐酸水苏碱的含量。取不同批号的妇康宁片3批分别进行测定，盐酸水苏碱含量分别为：0.195mg/片、0.203mg/片、0.190mg/片。

本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不是限制，因此凡是依据本发明的实质技术对以上实施例所作的任何细微修改、等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。