[发明专利]一种用于同时检测五种实验动物病原体的基因芯片试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种探针在制备检测五种实验动物病原体的基因芯片试剂盒中的应用，所述探针含有58条探针，所述的探针为SEQ ID NO.1～58所示的核苷酸序列，所述五种实验动物病原体为淋巴脉络丛脑膜炎病毒、泰泽病原体、汉坦病毒、支气管鲍特杆菌和鼠棒状杆菌。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于检测包括以下步骤 ：以检测样品的 DNA/cDNA为模板，以引物组进行平板PCR 扩增，随后用带荧光素标记的随机引物进行标记，扩展产物与基因芯片杂交，当扫描结果出现荧光信号时，判断样本中含有该病原。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的引物组包括5对引物，所述的引物组中的上下游引物为SEQ ID NO.59～68所示的核苷酸序列。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的平板PCR 体系中含有检测样品的 DNA/cDNA 10μL、引物组1μL、Taq 酶 2μL、BSA 1μL、Glycerol 5μL、 ddH2O 补足 100μL。

5.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的平板PCR 扩增条件：94℃预变性 5min，94℃变性30 s，55 ℃退火 30 s，72 ℃延伸 2min30s，循环 40 次，最后 72 ℃总延伸 10min。

6.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的荧光标记中荧光标记体系含有PCR产物5μL、荧光素标记的随机引物9N 3μL、5×Klenow Buffer 2.5 µL， klenow酶1 µL，ddH2O 补足 25 μL。

7.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的荧光标记的反应条件：37 ℃ 1.5 h，70℃，10 min。