[发明专利]一种间充质干细胞无血清培养基及培养方法有效
申请号: | 201711383518.8 | 申请日: | 2017-12-20 |
公开(公告)号: | CN108251359B | 公开(公告)日: | 2021-07-09 |
发明(设计)人: | 施坤宁;刘惠 | 申请(专利权)人: | 上海华新生物高技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京元中知识产权代理有限责任公司 11223 | 代理人: | 另婧 |
地址: | 201206 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 间充质 干细胞 血清 培养基 培养 方法 | ||
1.一种间充质干细胞无血清培养基,其特征在于,由基础培养基和添加成分组成,
所述的基础培养基选自L-DMEM培养基、DMEM-F12培养基和IMDM培养基中的一种;
所述的添加成分及浓度为:力生长因子20ng/ml、低氧诱导因子-1 10ng/ml、层粘连蛋白LN521 2.5μg/mL、CDLC 2%、bFGF20ng/ml、EGF 30ng/ml、VEGF 20ng/ml、HGF 20ng/ml、PDGF 20ng/ml、转铁蛋白0.2ng/ml、胰蛋白酶10-30μg /ml、抑肽酶0.1mg/ml、胰岛素5U/ml、白血病抑制因子500U/mL、胆碱二柠檬酸盐20nM、磷脂酰胆碱1ng/ml、磷脂酸钠盐1ng/ml、大豆卵磷脂1ng/ml、维生素C 50μg /ml、维生素 E 30μg /ml、维生素B12 30μg /ml、雌二醇1ng/mL、睾酮2ng/mL、孕酮2ng/mL、促肾上腺皮质激素0.5μg /ml、地塞米松0.2nM、肝素50μg/mL、乙醇胺20nM、还原型谷胱甘肽5μg /ml、亚硒酸钠15nM、柠檬酸铁2.5ng/mL、L- 谷氨酰胺5mM、2-巯基乙醇100mM。
2.一种利用权利要求1的无血清培养基培养间充质干细胞的培养方法,其特征在于,所述的间充质干细胞在氧体积分数为5%的低氧条件下进行培养。
3.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,培养间充质干细胞时培养箱内的条件为:含有5%O2,5% CO2。
4.根据权利要求3所述的培养方法,其特征在于,培养条件为:含有5%O2,5% CO2,温度为37℃,湿度饱和。
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