[发明专利]用于检测与有机磷农药相关的Ⅱ型糖尿病的易感基因芯片

说明书

本发明属于基因检测技术领域，公开了一种用于检测与有机磷农药相关的Ⅱ型糖尿病的易感基因芯片，以醛基玻璃为材质的固定相载体，用于检测与有机磷农药残留相关的Ⅱ型糖尿病易感基因的特异性寡核苷酸探针；所述特异性寡核苷酸探针的核苷酸序列SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：8，探针被固定在固相载体上。本发明利用互补碱基特异性杂交方法，实现了高通量的检测；操作简单，荧光染料标记后，洗片、荧光扫描仪检测结果，无需显色，检测快速，成本低，反应体系微量。检测结果假阳性率为3.25％，假阴性率为1.05％，具有很好的应用市场和经济效益，易规模化应用。

技术领域

本发明属于基因检测技术领域，尤其涉及一种用于检测与有机磷农药相关 的Ⅱ型糖尿病的易感基因芯片。

背景技术

糖尿病是一种常见的以慢性高血糖为主要特征的内分泌代谢疾病，最常见 的一类是Ⅱ型糖尿病，大约占糖尿病总数的90％左右。Ⅱ型糖尿病病因及发病 机理复杂，具有明显的遗传易感性，目前认为它是由遗传、环境、行为等多种 危险因素共同参与和相互作用引起的多因子疾病。近年来，随着人类基因组计 划的完成，高通量单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)检测基因 芯片的建立，一系列Ⅱ型糖尿病相关易感基因被发现。目前已经筛选出至少40 个和Ⅱ型糖尿病相关的易感基因。

农药，尤其是化学农药的使用，仍然是目前世界各国防治粮食和其它农作 物病虫害的主要和有效手段。有机磷类杀虫剂成为目前使用量最大的农药之一， 多属于高效农药。但是大量或长期接触有机磷农药或超标农产品，超过一定限 度后会导致一些慢性疾病，会直接危及人体的神经系统和肝、肾等重要器官， 干扰人体化学信息的传递，破坏身体的酶，阻碍器官发挥正常的生理功能，导 致功能失调。虽然少量的残留不会对人体造成立即的、直接的毒害，但是其分 子结构比较稳定，绝大多数在生物体内很难被代谢分解、排泄。有机磷农药会 干扰哺乳动物大脑、肝脏、骨骼肌及胰岛正常糖代谢功能，诱发实验动物高血 糖症，导致血糖代谢紊乱，增加糖尿病的患病率和死亡率，长期暴露可导致胰 岛素抵抗的发生。

国内外已有的有机磷农药与Ⅱ型糖尿病相关性研究表明，有机磷农药会干 扰哺乳动物大脑、肝脏、骨骼肌及胰岛正常糖代谢功能，诱发实验动物高血糖 症，而且有机磷农药中毒与人体应激性高血糖之间也存在相关性。人体若长期 微量接触有机磷农药可能会增加患Ⅱ型糖尿病的危险。因此综合遗传和环境因 素，采用生物芯片和基因测序技术，研究Ⅱ型糖尿病基因易感性和有机磷农药 之间的相关性已成为当务之急，以此研究成果作为靶向治疗药物选择的依据， 应用于Ⅱ型糖尿病精准治疗和防控工作，为有机磷农药残留所致的Ⅱ型糖尿病 患者在易感基因筛查、早期诊断和精准治疗方面提供科学依据。

糖尿病易感基因检测方法以往一般采用PCR-RFLP和DNA测序方法等，但 存在一定不足，如操作时间长、步骤繁琐、易漏检、不适用于批量、多位点、 特殊结构序列检测等，给糖尿病的临床诊断带来困难。目前尚缺少与有机磷农 药相关的Ⅱ型糖尿病易感基因检测芯片，已有的Ⅱ型糖尿病易感基因检测基因 芯片与长期接触有机磷农药所导致的Ⅱ型糖尿病之间缺少关联性，不能作为靶 向治疗药物选择的依据。如何快速、准确地检测与有机磷农药相关的Ⅱ型糖尿 病易感基因突变是糖尿病临床诊断需要解决的问题。基因芯片是近些年来兴起 的一项重要检测技术，应用于基因多态性分析、诊断、易感基因检测、致病菌快速筛查等。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种用于检测与有机磷农药相关 的Ⅱ型糖尿病的易感基因芯片。

本发明是这样实现的，一种用于检测与有机磷农药相关的Ⅱ型糖尿病4个 易感基因的芯片，所述基因芯片包括以醛基玻璃为材质的固定相载体，用于检 测有机磷农药残留导致的Ⅱ型糖尿病易感基因的特异性寡核苷酸探针；

所述特异性寡核苷酸探针的核苷酸序列见表1，探针被固定在固相载体上。

进一步，所述用于检测与有机磷农药相关的Ⅱ型糖尿病4个易感基因的芯 片为：