[发明专利]高效液相色谱-串联质谱检测血清中氨基酸的方法

权利要求书

1.高效液相色谱-串联质谱检测血清中氨基酸的方法，其特征在于，其取10μL血清样本，加入10μL 2mM混合内标溶液，涡旋混合，再加入180μL甲醇/乙腈混合液，使用14000rcf、4℃离心15分钟，取160μL上清液进行真空干燥，再使用200μL 50％乙腈溶液复溶，使用14000rcf、4℃离心15分钟，取上清液进行HILIC-MS/MS分析；所述的HILIC色谱中的洗脱方式为：

流动相A是25mM甲酸铵+0.08％甲酸水溶液；流动相B是0.1％甲酸的乙腈溶液；

所述的混合内标溶液包括同位素内标氨基酸L-Glutamate-D₅、L-Lysine-D₄、Arginine-¹³C₆、L-Glutamine-D₅、L-Serine-¹³C₃,¹⁵N、L-Methionine-¹³C₅,¹⁵N、L-Phenyalanine(ring-D₅)、L-Tyrosine-¹³C₉、L-Leucine-¹³C₉、L-Histidine-¹³C₆、DL-Proline-D₇、DL-Valine-D₈、L-Threonine-D₅,¹⁵N、L-Aspartate-¹³C₄,¹⁵N、L-Cysteine-¹³C₃,¹⁵N、DL-cystine-D₄、L-Alanine-D₄、L-Tryptophan-¹³C₁₁和L-Ornithine-D₆；

待检测氨基酸包括Tryptophan、Spermidine、4-hydroxyproline、Ornithine、Taurine、Creatinine、creatine、Alanine、Asparagine、Citrulline、Glycine、Serine、Proline、Valine、Threonine、Leucine、Isoleucine、Lysine、Glutamate、Glutamine、Methionine、Histidine、Phenylalanine、Arginine、Tyrosine、Cystine和Cysteine。