[发明专利]一组着丝粒蛋白F(CENPF)分片段抗原及其应用在审
申请号: | 201711402512.0 | 申请日: | 2017-12-22 |
公开(公告)号: | CN109957027A | 公开(公告)日: | 2019-07-02 |
发明(设计)人: | 黄坚;李斯文;李潇瑾;徐安健;张蓓;王何静 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学附属北京友谊医院 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;G01N33/574 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100050*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 片段抗原 肝细胞癌 抗体水平 血清标本 着丝粒 血清 蛋白 制备蛋白芯片 高危人群 疾病状态 抗体检测 早期诊断 综合评估 敏感度 筛查 应用 检测 | ||
1.一组CENPF蛋白分片段抗原,其特征在于,CENPF分片段抗原为一组带有GST或His标签的融合蛋白,经生物信息学软件预测优势抗原表位肽段,共包括8个片段:121-220a.a,335-416a.a,1100-1265a.a,1670-1791a.a,1759-2093a.a,2075-2210a.a,2485-2592a.a,2808-2960a.a。采用化学合成的方法合成基因,与可溶性表达载体pGEX-4T-1构建表达人CENPF重组表达质粒,转化到感受态大肠杆菌BL21(DE3)并诱导其表达可溶性GST-CENPF或CENPF-His融合蛋白,收集菌体后处理得到菌体上清,利用亲和层析柱纯化得到重组CENPF抗原蛋白。
2.如权利要求1所述CENPF蛋白分片段抗原制备的蛋白芯片,其特征在于,将制备的8个CENPF重组抗原片段固定在醛基化载玻片上,制成蛋白芯片,然后采用间接ELISA法进行血清CENPF抗体的检测。
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