[发明专利]一种在部分肝脏切除术后促进小鼠肝种植瘤生长的方法

权利要求书

1.一种在部分肝脏切除术后促进小鼠肝种植瘤生长的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)小鼠肝癌细胞系的培养，采用腹水培养方式培养小鼠肝癌细胞系，将肝癌细胞与PBS按1：1比例配制成细胞悬液，注射至小鼠腹腔内，1周后抽取小鼠腹水进行离心，使用PBS进行多次洗涤，得到纯净小鼠肝癌细胞悬液；

(2)裸鼠肩胛部种植瘤的构建，取肝癌细胞，与0.1mlPBS配置成细胞悬液，注射到裸鼠肩胛部，2周后裸鼠肩胛部可生成明显肿瘤，行病理学检查确认为肝细胞癌组织；

(3)小鼠不同比例肝脏切除模型的建立，按照不同切除比例切除小鼠肝脏左外叶制作对应比例的小鼠肝脏切除模型；

(4)小鼠肝脏种植瘤模型的构建，将裸鼠肩胛部种植瘤组织剪成1mm³大小的瘤组织块，放在无菌PBS溶液中进行清洗，将瘤组织块种植在小鼠肝右叶组织中。

2.如权利要求1所述的在部分肝脏切除术后促进小鼠肝种植瘤生长的方法，其特征在于包括如下步骤：

小鼠H22肝癌细胞系培养：本细胞系采用腹水培养方式；将2×10^⁶个H22肝癌细胞与PBS按1：1比例配制成1ml细胞悬液，注射至C57BL/6J小鼠腹腔内，1周后抽取小鼠腹水进行离心，使用PBS进行多次洗涤，得到纯净小鼠H22肝癌细胞悬液；

裸鼠肩胛部种植瘤构建：取2×10^⁶个H22肝癌细胞，与0.1mlPBS配置成细胞悬液，注射到裸鼠肩胛部，2周后裸鼠肩胛部可生成明显肿瘤，行病理学检查确认为肝细胞癌组织(由中山大学附属第三医院两位病理学医师判断)；

小鼠不同比例肝脏切除模型的建立：切除小鼠肝脏左外叶制作30％肝脏切除模型，切除小鼠中叶和左外叶制作70％肝脏切除模型；

小鼠肝脏种植瘤模型的构建：将裸鼠肩胛部种植瘤组织剪成1mm³大小的瘤组织块，放在无菌PBS溶液中进行清洗，将瘤组织块种植在小鼠肝右叶组织中。

3.如权利要求2所述的在部分肝脏切除术后促进小鼠肝种植瘤生长的方法，其特征在于，包含如下分组实验：

将40只BALB/c nu裸鼠按照随机数字表法分四组：A组，无肝脏切除组，将瘤组织块种植在小鼠肝右叶组织中；B组，30％肝脏切除组，小鼠行30％肝脏切除术后接种瘤组织块；C组，70％肝脏切除组，小鼠行70％肝脏切除术后接种瘤组织块；D组，70％肝脏切+Hh信号抑制剂组，小鼠行后70％肝脏切除术后接种瘤组织块，接种后每天经腹腔注射Hh信号抑制剂环巴胺，剂量为30mg/kg/d。