[发明专利]一种检测细胞源病毒抗原液的分离纯化效果的方法

说明书

本发明涉及一种检测细胞源病毒抗原液的分离纯化效果的方法，所述方法包括以下步骤：取经过分离纯化后的细胞源病毒抗原液，对所述细胞源病毒抗原液进行浊度定量检测，记为A值；如果A值≤90NTU，则所述细胞源病毒抗原液的分离纯化效果合格；若A值＞90NTU，则所述细胞源病毒抗原液的分离纯化效果不合格，继续分离纯化操作，并检测A值，直至A值≤90NTU。本发明所述方法能够相对而言较为准确地对病毒抗原的分离效果进行评估，满足疫苗生产需要，具有快速、简单、实时、性价比高的优点。

技术领域

本发明涉及抗原纯化领域，具体而言，涉及一种检测细胞源病毒抗原液的分离纯化效果的方法。

背景技术

疫苗(vaccine)，是指将病原微生物(如细菌、病毒等)及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。目前，疫苗已经成为人类主动防御各种传染病的最重要手段之一。

病毒是专营宿主细胞内寄生型微生物，因此，除少量基因工程疫苗外，现阶段制备疫苗制剂用病毒主要通过大规模培养动物或植物细胞并接种病毒，最终收集细胞裂解后释放至培养基中的病毒的方式生产获得。

然而，生产结束后，细胞培养基中不但包括可用作疫苗的病毒，还包括细胞破裂释放病毒时形成的细胞残骸和胞内大颗粒物质等，如果不纯化处理而直接用于制备疫苗，不但免疫效果不佳，而且对动物和人体存在诸多安全风险。因此，有必要对收获的培养基进行分离纯化。而如何快速、有效地检测培养基的纯化效果，对判定纯化操作的停止节点、评价纯化操作的有效性、以及评估疫苗的质量具有极为重要的意义。

现有对抗原纯化效果的检测方法主要有两种：

(1)通过凯氏定氮法测定样品液中总蛋白的含量，从而大致估计样品中病毒抗原的纯化效果；(2)通过肉眼观察样品液的澄清度判断样品液的离心效果。

而无论是凯氏定氮法还是肉眼观察法在评估病毒抗原纯化效果方面都存在较大的缺陷。首先，凯氏定氮法是一种比较复杂的滴定方法，需要专门的实验室进行检测，检测过程长，不利于在生产现场快速地对抗原纯化效果进行判断，无法实现在生产过程中实时监测，无法有效保证抗原质量；而且凯氏定氮法比较繁琐，涉及到硫酸、硼酸、盐酸等危险化学品，容易对人员造成安全威胁。其次，肉眼观察澄清度的方法，主观性太强，因人而异，误差大。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种检测细胞源病毒抗原液的分离纯化效果的方法，所述方法能够相对而言较为准确地对病毒抗原的分离效果进行评估，满足疫苗生产需要，具有快速、简单、实时、性价比高的优点。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种检测细胞源病毒抗原液的分离纯化效果的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)取经过分离纯化后的细胞源病毒抗原液，对所述细胞源病毒抗原液进行浊度定量检测，记为A值；

(2)如果A值≤90NTU，则所述细胞源病毒抗原液的分离纯化效果合格；若A值＞90NTU，则所述细胞源病毒抗原液的分离纯化效果不合格，继续分离纯化操作，并检测A值，直至A值≤90NTU。

具体实施方式

一种检测细胞源病毒抗原液的分离纯化效果的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)取经过分离纯化后的细胞源病毒抗原液，对所述细胞源病毒抗原液进行浊度定量检测，记为A值；

(2)如果A值≤90NTU，则所述细胞源病毒抗原液的分离纯化效果合格；若A值＞90NTU，则所述细胞源病毒抗原液的分离纯化效果不合格，继续分离纯化操作，并检测A值，直至A值≤90NTU。