[发明专利]一种沙冬青的快繁方法

说明书

本发明涉及一种沙冬青的快繁方法，属于无性繁殖技术领域。本发明快繁方法通过对沙冬青无菌苗愈伤组织诱导、分化培养、生根培养条件的设置，在保持珍惜濒危植物沙冬青本身优良性状的基础上，解决了沙冬青扦插繁殖难以生根的问题。繁殖周期短、生根速率快、成活率高、培养成本低，能为沙冬青种质资源保护及优质苗木的生产、研究奠定良好的前期基础。

技术领域

本发明涉及无性繁殖技术领域，具体涉及一种沙冬青的快繁方法。

背景技术

沙冬青(Ammopiptanthus mongolicu)属豆科沙冬青属，是荒漠区数量不多的常绿沙生灌木，广泛分布于内蒙古、宁夏、甘肃，在甘肃主要分布于河西走廊及黑河流域。沙冬青对环境条件适应能力极强，抗旱、耐寒、耐贫瘠、耐盐碱，而且根系发达，对防沙固沙、防止水土流失、改善环境具有十分重要的作用。因此，该植物在改善环境方面具有很好的生态效益，是潜在的、待开发利用的干旱、半干旱地区植被恢复重建的生态树种。

但是，目前沙冬青大多数采用种子播种繁殖，成苗后常发生遗传性状的分离、变异；而采用常规的无性繁殖扦插方法时，沙冬青难以生根、且扦插过程中插条容易腐烂，影响其繁殖。现有技术并没有关于生根率高的沙冬青组织培养无性快繁方面系统的研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种沙冬青的快繁方法。本发明提供的快繁方法繁殖周期短、生根速率快、成活率高、培养成本低，能为沙冬青种质资源保护及优质苗木的生产、研究奠定良好的前期基础。

本发明提供了一种沙冬青的快繁方法，包括以下步骤：

1)将沙冬青无菌苗进行切割，得到茎段，将所述茎段在诱导愈伤培养基上进行诱导愈伤培养25～30d，得到愈伤组织；所述诱导愈伤培养基以改良B5培养基为基准，包括0.5～0.8mg/L的KT、0.15～0.2mg/L的2,4-D、25～30g/L的蔗糖和4.5g/L的琼脂，pH为5.8～6.0；

2)将所述步骤1)中的愈伤组织在不定芽分化培养基上进行分化培养35～42d，得到带有茎节的不定芽；所述不定芽分化培养基以改良B5培养基为基准，包括0.5～1.0mg/L的NAA、0.2～0.5mg/L的6-BA、25～30g/L的蔗糖和4.5g/L的琼脂，pH为5.8～6.0；

3)将所述步骤2)中带有茎节的不定芽在生根培养基上进行生根培养20～25d，得到沙冬青植株；所述生根培养基以改良B5培养基为基准，包括1.0～1.5mg/L的2，4-D、1000～1300mg/L蛋白胨、10～15g/L的蔗糖和4.5g/L的琼脂，pH为5.8～6.0；

所述改良B5培养基包括大量元素、微量元素、铁盐和有机成分；

所述大量元素包括：硝酸钾2000.00mg/L、氯化钙100.00mg/L、硫酸镁333.33mg/L、磷酸二氢钠100.00mg/L、硫酸铵89.30mg/L；

所述微量元素包括：硼酸3.00mg/L、硫酸锌2.00mg/L、碘化钾0.75mg/L、硫酸铜0.025mg/L、钼酸钠0.25mg/L、硫酸锰10.00mg/L、氯化钴0.025mg/L；

所述铁盐包括：乙二胺四乙酸二铁28.00mg/L；

所述有机成分包括：肌醇100.00mg/L、烟酸1.00mg/L、盐酸吡哆醇1.00mg/L、盐酸硫胺素10.00mg/L。

优选的是，所述步骤1)无菌苗的制备方法包括以下步骤：

a)将沙冬青种子进行浸泡、消毒，得到消毒后的沙冬青种子；

b)将所述消毒后的沙冬青种子接种于无菌苗培养基进行无菌苗培养10～15d，得到无菌苗；所述无菌苗培养基以所述改良B5培养基为基准，包括25g/L的蔗糖和4.5g/L的琼脂，pH为5.8～6.0。