[发明专利]粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法

权利要求书

1.一种粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，该方法包括以下步骤：

S1，将粮食和粮食制品粉碎处理后溶解在有机溶液中涡旋、振荡并静置；

S2，取静置后的上清液用超纯水进行稀释；

S3，将稀释后的所述上清液固相萃取富集净化，并收集洗脱液；

S4，将所述洗脱液进行高效液相色谱串联质谱检测，包括：

S41，高效液相色谱分离，流动相A选择为乙酸铵水溶液，流动相B选择为乙腈溶剂；梯度洗脱，所述梯度洗脱程序为：在第0～2分钟，流动相A与流动相B的体积比100:0；在第2～3分钟，流动相A与流动相B的体积比40:60；在第3～19分钟，流动相A与流动相B的体积比30:70；在第19～21分钟，流动相A与流动相B的体积比100:0；以及

S42，质谱检测。

2.根据权利要求1所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述乙酸铵水溶液浓度为1mmol/L～10mmol/L。

3.根据权利要求2所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述乙酸铵水溶液浓度为2mmol/L。

4.根据权利要求1所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述步骤S1中所述有机溶剂为第一乙腈水溶液。

5.根据权利要求4所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述第一乙腈水溶液中乙腈的体积分数为85％。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述恩镰孢菌素包括恩镰孢菌素A、恩镰孢菌素A₁、恩镰孢菌素B和恩镰孢菌素B₁中的至少一种。

7.根据权利要求1所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述质谱检测条件为：

离子源为电喷雾离子源，扫描模式为正离子扫描，去溶剂温度为500～600℃，离子化电压为5000～6000v，驻留时间为100～300ms。

8.根据权利要求7所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述质谱检测的条件为：

离子源为电喷雾离子源，扫描模式为正离子扫描，去溶剂温度为550℃，离子化电压为5500v，气帘气压力为30psi，碰撞气为中等流速，雾化气压力为80psi，辅助加热气压力为80psi，驻留时间为200ms，检测方式为多反应监测。

9.根据权利要求1所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述步骤S3中所述固相萃取富集净化的步骤包括：

S30，对固相萃取所用的固相萃取柱进行活化；

S31，将步骤S2中稀释后的所述上清液过活化后的所述固相萃取柱；

S32，用不同浓度的第二乙腈水溶液依次淋洗所述固相萃取柱；以及

S33，用第三乙腈水溶液洗脱所述固相萃取柱，收集所述洗脱液备用。

10.根据权利要求9所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述步骤S32中所述不同浓度的第二乙腈水溶液依次是与水的体积比为10：90和50：50的乙腈水溶液；所述步骤S33中所述第三乙腈水溶液是与水的体积比为90：10的乙腈水溶液。

11.根据权利要求9所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述固相萃取柱为十八烷基硅烷键合硅胶。

12.根据权利要求9所述的粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，其特征在于：所述步骤S30中，所述活化固相萃取柱的方法为先用甲醇后用超纯水对固相萃取柱进行活化。