[发明专利]粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法

说明书

一种粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，该方法包括以下步骤：S1，将粮食和粮食制品粉粹处理后溶解在有机溶液中涡旋、振荡并静置；S2，取静置后的上清液用超纯水进行稀释；S3,将稀释后的上清液固相萃取富集净化，并收集洗脱液；S4，将洗脱液进行高效液相色谱分离，流动相A选择为乙酸铵水溶液，流动相B选择为乙腈溶剂。梯度洗脱，所述梯度洗脱程序为：在第0～2分钟，流动相A与流动相B的体积比100:0；在第2～3分钟，流动相A与流动相B的体积比40:60；在第3～19分钟，流动相A与流动相B的体积比30:70；在第19～21分钟，流动相A与流动相B的体积比100:0；S5，对经过梯度洗脱后的进样液进行质谱检测。

技术领域

本发明属于食品真菌毒素检测领域，具体涉及一种粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法。

背景技术

白僵菌素(beauvericin，BEA)和恩镰孢菌素(enniatins，ENNs)是由某些镰刀菌如再育镰刀菌(Fusarium proliferatum)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和燕麦镰刀菌(F.avenaceum)等侵染小麦、大麦、黑麦和燕麦等谷物后，在潮湿和低温条件下产生的一类真菌毒素。根据其化学结构，该类化合物称为六酯肽类真菌毒素。据报道，该类毒素具有一定的基因毒性和细胞毒性，可诱导染色体畸变、姐妹染色单体交换和微核形成等。同时，该类毒素还是离子化载体抑制剂、酶抑制剂和氧化应激诱导剂。目前，已在意大利、西班牙、巴西、日本和伊朗等国的谷物及其制品中检测到该类毒素。由于该类毒素对粮食及其制品污染的严重性和普遍性，近年来受到国内外科学界和管理部门的普遍关注。然而我国目前尚无粮食及其制品中该类毒素检测方法及污染状况的报道。我国是粮食生产和消费大国，粮食安全关乎国民健康和社会发展。因此，为监测我国粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的污染状况，亟需建立一种快速准确的可同时测定粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素含量的分析方法。

发明内容

基于此，有必要提供一种粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法。

一种粮食及其制品中白僵菌素和恩镰孢菌素的协同检测方法，该方法包括以下步骤：

S1，将粮食和粮食制品粉粹处理后溶解在有机溶液中涡旋、振荡并静置；

S2，取静置后的上清液用超纯水进行稀释；

S3，将稀释后的上清液固相萃取富集净化，并收集洗脱液；

S4，将洗脱液进行高效液相色谱分离，流动相A选择为乙酸铵水溶液，流动相B选择为乙腈溶剂。梯度洗脱，所述梯度洗脱程序为：在第0～2分钟，流动相A与流动相B的体积比100:0；在第2～3分钟，流动相A与流动相B的体积比40:60；在第3～19分钟，流动相A与流动相B的体积比30:70；在第19～21分钟，流动相A与流动相B的体积比100:0；

S5，对经过梯度洗脱后的进样液进行质谱检测。

在其中一个实施例中，所述乙酸铵水溶液浓度为1mmol/L～10mmol/L。

在其中一个实施例中，所述乙酸铵水溶液浓度为2mmol/L。

在其中一个实施例中，所述步骤S1中所述有机溶剂为第一乙腈水溶液。

在其中一个实施例中，所述第一乙腈水溶液中的乙腈体积分数为85％。

在其中一个实施例中，所述恩镰孢菌素包括恩镰孢菌素A、恩镰孢菌素A₁、恩镰孢菌素B和恩镰孢菌素B₁中的至少一种。

在其中一个实施例中，所述质谱测定方法如下：

离子源为电喷雾离子源，扫描模式为正离子扫描，去溶剂温度为500～600℃，离子化电压为5000～6000v，驻留时间为100～300ms。