[发明专利]一种检测尿酸的荧光传感器及其制备方法

权利要求书

1.一种检测尿酸的荧光传感器的制备方法，其特征在于：包括下列步骤：

1）配制不同浓度单位的尿酸溶液；

2）将具有荧光特性的二维金属有机骨架材料NH₂-BDC-MOF纳米片分散于超纯水中超声30 min，离心取上清液备用，上清液中NH₂-BDC-MOF纳米片的浓度为200μg/mL；

3）取尿酸酶溶解在三（羟甲基）氨基甲烷-盐酸盐缓冲液中制得尿酸酶溶液，避光贮存在4℃备用；

4）取邻苯二胺溶解在三（羟甲基）氨基甲烷-盐酸盐缓冲液中制得邻苯二胺溶液，避光贮存在4℃备用；

5）分别取步骤2）配制的200μg /mL的NH₂-BDC-MOF 纳米片溶液 50 μL、步骤3）配制0.1U/mL的尿酸酶溶液10 μL与步骤4）配制2 mM的邻苯二胺溶液50 μL，将三者震荡混合后，加入90 μL、50 mM、pH 7.4的Tris-HCl缓冲液补充体积到200 μL，于37℃下放置30分钟，检测荧光信号；

6）取步骤2）配制的200 μg/mL的NH₂-BDC-MOF 纳米片溶液 50 μL、步骤3）配制0.1 U/mL的尿酸酶溶液10μL与50 μL不同浓度相同体积的尿酸溶液，再加入步骤4）配制2 mM的邻苯二胺溶液50 μL，将四者震荡混合后，加入40 μL 、50 mM pH 7.4的Tris-HCl缓冲液补充体积到200 μL，于37℃下孵育30分钟，检测不同浓度尿酸存在下的荧光信号；

7）根据不同浓度尿酸的荧光信号，构建荧光信号—浓度工作曲线。

2.根据权利要求1所述的检测尿酸的荧光传感器的制备方法，其特征在于：步骤2）所述的二维金属有机骨架材料NH₂-BDC-MOF纳米片的制备方法，包括以下步骤：

（1）将1.0-3.0 mg邻氨基对苯二甲酸溶解在2.0-5.0 mL 体积比为2:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶剂中；

（2）将2.0-4.0 mg三水合硝酸铜溶解在2.0-5.0 mL体积比为1:2的 N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶剂中；

（3）配制1.0-3.0 mL 体积比为1:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶剂作为连接液；

（4）将邻氨基对苯二甲酸溶液先加入到直径为1.0-2.0 cm、容量为10-30 mL的试管底部，再加入1.0-3.0 mL的连接液，最后加入步骤2）制得的硝酸铜溶液；

（5）在试管在30-50℃水浴，对邻氨基对苯二甲酸层进行加热，反应24-48小时；

（6）得到灰色产物，利用离心洗去N，N-二甲基甲酰胺与乙腈，于真空烘箱中60-100℃干燥，制得二维金属有机骨架材料NH₂-BDC-MOF纳米片。

3.根据权利要求2所述的检测尿酸的荧光传感器的制备方法，其特征在于：步骤2）所述的二维金属有机骨架材料NH₂-BDC-MOF纳米片的制备方法，包括以下步骤：

（1）将1.5 mg邻氨基对苯二甲酸溶解在3.0 mL 体积比为2:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶剂中；

（2）将3.0 mg三水合硝酸铜溶解在3.0 mL体积比为1:2的 N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶剂中；

（3）配制2.0 mL 体积比为1:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶剂作为连接液；

（4）将邻氨基对苯二甲酸溶液先加入到直径为1.5 cm、容量为25 mL的试管底部，再加入2.0 mL的连接液，最后加入步骤2）制得的硝酸铜溶液；

（5）在试管在40℃水浴，对邻氨基对苯二甲酸层进行加热，反应24小时；

（6）得到灰色产物，利用离心洗去N，N-二甲基甲酰胺与乙腈，于真空烘箱中80℃干燥，制得二维金属有机骨架材料NH₂-BDC-MOF纳米片。

4.一种如权利要求1-3任一项所述的制备方法制得的检测尿酸的荧光传感器。

5.一种如权利要求4所述的荧光传感器的使用方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）取NH₂-BDC-MOF 纳米片溶液、尿酸酶溶液与邻苯二胺溶液，将三者震荡混合后，于37℃下放置30分钟，检测荧光信号；

2）往步骤1）中加入样品溶液，于37℃下孵育30分钟，检测荧光信号；

3）将荧光信号代入荧光信号—浓度工作曲线，得出样品中尿酸含量。