[发明专利]一种用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法

权利要求书

1.一种用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法，其特征在于：(4-氯苯基)(2-吡啶基)甲酮在酮还原酶催化作用下，转化为（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇，所述酮还原酶的氨基酸序列如（a）或（b）所述：

（a）、所述酮还原酶具有如表SEQ ID No.2 所记载的氨基酸序列；

（b）、所述酮还原酶为将表SEQ ID No.2 中的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且能催化(4-氯苯基)(2-吡啶基)甲酮转化为（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的酮还原酶。

2.如权利要求1所述的用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法，其特征在于：（b）所述的酮还原酶的氨基酸序列与（a）所述酮还原酶的氨基酸序列具备90%以上的同源性，且能催化(4-氯苯基)(2-吡啶基)甲酮转化为（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇。

3.如权利要求1所述的用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法，其特征在于：所述酮还原酶的基因序列如下（c）或（d）所示：

（c）、基因的核苷酸序列为序列表SEQ ID No.1所示基因序列；

（d）、与（c）具有90%以上的同源性，且能催化(4-氯苯基)(2-吡啶基)甲酮转化为（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的酮还原酶的基因序列。

4.如权利要求1所述的用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法，其特征在于：(4-氯苯基)(2-吡啶基)甲酮在酮还原酶催化作用下，转化为（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇，步骤包括：将(4-氯苯基)(2-吡啶基)甲酮、酮还原酶酶粉或含有酮还原酶的细胞、辅酶、缓冲剂一起配制成水/异丙醇混合溶液，反应得到产物。

5.如权利要求4所述的用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法，其特征在于：所述(4-氯苯基)(2-吡啶基)甲酮浓度为1～230g/L；酮还原酶酶粉浓度为2～20g/L或含有酮还原酶的细胞的浓度为20～90g/L。

6.如权利要求4所述的用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法，其特征在于：所述水/异丙醇溶液中异丙醇与水体积比为1:6～15。

7.如权利要求4所述的用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法，其特征在于：反应温度为24～45℃。

8.如权利要求4所述的用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法，其特征在于：反应时间为5～36h。

9.如权利要求4所述的用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法，其特征在于：反应体系中还添加有辅酶因子，所述辅酶选自NAD+、NADH、NADP+和NADPH 的任意一种或它们的组合物；辅酶浓度为0.1～0.4g/L。

10.如权利要求4所述的用于制备（R）-(4-氯苯基)-2-吡啶甲醇的生物催化方法，其特征在于：所述含有酮还原酶的细胞选自基因工程改造的酵母菌或大肠杆菌。