[发明专利]一种提取残留DNA的方法在审
| 申请号： | 201711421227.3 | 申请日： | 2017-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN109957561A | 公开（公告）日： | 2019-07-02 |
| 发明（设计）人： | 翟玉贵;朱秀娟 | 申请（专利权）人： | 无锡药明康德生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京奉思知识产权代理有限公司 11464 | 代理人： | 吴立;邹轶鲛 |
| 地址： | 214092 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 孵育 残留 月桂酰肌氨酸钠 准确度 核酸分子 混合溶液 室温环境 碘化钠 裂解液 上清液 盐溶液 异丙醇 生物制品 糖原 沉淀 释放 | ||
1.一种提取核酸的方法，其特征在于，包括：
步骤1、向待提取样品中加入裂解液以释放核酸分子，混合并孵育；
步骤2、向样品中加入月桂酰肌氨酸钠盐溶液；
步骤3、向样品中加入含有碘化钠、糖原、异丙醇的混合溶液，并在室温环境下孵育；
步骤4、将样品离心，除去上清液，收集沉淀。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括以下步骤：
溶解提取的核酸，进行PCR检测，计算加标回收率。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述裂解液为包含去垢剂和蛋白酶K的混合液，其中去垢剂包含EDTA溶液和SDS溶液。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，经步骤1混合后的溶液中EDTA终浓度为10mM以上，SDS的质量百分含量为0.1％至1％。
5.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，经步骤3混合后的溶液中月桂酰肌氨酸钠盐的质量百分含量为0.5％以上。
6.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，经步骤3混合后的溶液中碘化钠的终浓度为大于1.6M。
7.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述待提取样品是由宿主细胞生产的蛋白质，优选由CHO细胞株生产的蛋白质。
8.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤1中所述孵育使用的温度为57℃。
9.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤3中所述的室温为10℃至30℃中任一温度。
10.一种提取核酸的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括裂解液、月桂酰肌氨酸钠盐溶液、含有碘化钠、糖原、异丙醇的混合溶液。
11.如权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，所述裂解液为包含去垢剂和蛋白酶K的混合液，其中去垢剂包含EDTA溶液和SDS溶液。
12.如权利要求11所述的试剂盒，其特征在于，在向样品加入裂解液后，SDS的质量百分含量为0.1％至1％。
13.如权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，在加入月桂酰肌氨酸钠盐混后的溶液和含有碘化钠、糖原、异丙醇的混合溶液混合后的溶液后，所述月桂酰肌氨酸钠盐的质量百分含量为0.5％以上。
14.如权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，经加入含有碘化钠、糖原、异丙醇的混合溶液混合后的溶液中，碘化钠的终浓度为1.62M。
15.如权利要求10至14任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括样本提取装置或使用如权利要求1只9任一项所述方法的说明书。
16.如权利要求15所述的试剂盒，其特征在于，所述样本提取装置为96孔板。
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