[发明专利]高效液相离子色谱法检测牛蒡含片中水解菊糖成分的方法

说明书

本发明属于高效液相色谱法分析技术领域，具体提供一种应用高效液相离子色谱法检测牛蒡含片中水解菊糖成分的方法，对牛蒡含片进行水解后得到牛蒡菊糖水解液，对水解液进行脱色后注入高效液相色谱仪，得到菊糖充分水解后各组分的色谱图。优化了牛蒡菊糖含片中功能性低聚糖的生产工艺参数，对生产实践具有现实的指导意义，尤其弥补了紫外风光光度计法对产品品质检测灵敏度较低，不适合复杂成分的样品检测的缺陷。

技术领域

本发明属于高效液相色谱法分析技术领域，具体提供一种高效液相离子色谱法检测牛蒡含片中水解菊糖成分的方法。

背景技术

现有技术中对于牛蒡菊糖水解成分的测定，多采用风光光度计法，无法明确地测定出牛蒡菊糖水解后的具体成分。

牛蒡菊糖含片作为一种营养品，其有效成分为菊糖充分水解后的低聚果糖，低聚果糖可促进人体内双歧杆菌和乳酸杆菌的增殖而抑制病原菌如大肠杆菌、梭状芽胞杆菌和沙门氏菌的生长。市面上的牛蒡含片菊糖水解液中低聚果糖的含量，其检测结果充分说明产品的功能性和经济附加值。而利用风光光度计法是无法具体测定其含量的。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种高效液相离子色谱法检测牛蒡含片中水解菊糖成分的方法，能够精确测出牛蒡菊糖水解后的各个成分，从而为牛蒡菊糖含片的生产提供指导。

本发明是这样实现的，高效液相离子色谱法检测牛蒡含片中水解菊糖成分的方法，包括如下步骤：

1)菊糖水解液的制备：将牛蒡含片烘干粉碎过筛，按照1:10-50的料液比加水，在40-80℃的温度、125-225W的功率下，超声波清洗器中水解10-50min，制得菊糖水解液；

2)脱色：常温下，将步骤1)制备的菊糖水解液通过经预处理、装柱后的阴离子交换树脂，控制流速为1L/h，阴离子交换树脂用量为菊糖水解液质量的1-4％，作用时间0.5-2.5h，得到脱色后的菊糖水解液；

3)将步骤2)得到的脱色后的菊糖水解液注入高效液相色谱仪，得到牛蒡菊糖含片中菊糖水解后各个成分的液相色谱图，根据各个标准品出现峰形的时间，确定菊糖水解液中的成分。

进一步地，步骤1)中将牛蒡含片烘干粉碎过筛，按照1:50的料液比加水，在80℃的温度、225W的功率下，超声波清洗器中水解50min，制得菊糖水解液；步骤2)中菊糖水解液与阴离子交换树脂的作用时间为1.5h。

进一步地，步骤2)中阴离子交换树脂的预处理为：先将阴离子交换树脂用3-7％NaOH溶液浸泡3-5h，然后用去离子水冲洗干净，接着用3-7％HCL溶液浸泡3-5h，用去离子水冲洗干净，再用3-7％NaOH溶液浸泡3-5h，最后用蒸馏水冲洗至pH8.0，在烘箱中60℃烘干，备用。

进一步地，所述阴离子交换树脂的装柱、脱色具体过程为：取直径为30mm，长度为500mm的玻璃离子交换柱，关闭交换柱的出口，自顶部注入部分阴离子交换树脂悬浮液，待树脂沉降后，加入菊糖水解液，再加入剩余阴离子交换树脂，至离交换柱顶端4-5厘米高度即可，再用去离子水自顶部洗涤，使流出的液体的pH为7.0为止。

与现有技术相比，本发明的优点在于，通过将牛蒡菊糖含片制成水解液，利用高效液相色谱法，精确测定出牛蒡菊糖水解后的各个成分，优化了牛蒡菊糖含片中功能性低聚糖的生产工艺参数，对生产实践具有现实的指导意义，尤其弥补了紫外风光光度计法对产品品质检测灵敏度较低，不适合复杂成分的样品检测的缺陷。

附图说明

图1为蔗糖标准曲线；

图2为低聚果糖标准曲线；

图3为水解30min的牛蒡菊糖水解液中的各个成分；

图4为水解50min的牛蒡菊糖水解液中的各个成分。

具体实施方式