[发明专利]半富马酸替诺福韦艾拉酚胺生产中潜在杂质的合成方法

说明书

本发明公开了半富马酸替诺福韦艾拉酚胺生产工艺中潜在杂质和降解杂质的制备方法。列明半富马酸替诺福韦艾拉酚胺的杂质谱图，对改进生产工艺、提高产品内控质量起到指导作用。

技术领域

本发明涉及一种半富马酸替诺福韦艾拉酚胺生产中潜在杂质的合成方法。

背景技术

替诺福韦艾拉酚胺(tenofovir alafenamide，TAF，GS-7340)是RNA依赖性的DNA多聚酶抑制剂，是替诺福韦(tenofovir，TFV)的口服前药。类似于替诺福韦酯，TAF在细胞内转换成TFV，目前主要用于治疗艾滋病，并在Ⅲ期临床试验中表现出很好的抗HBV疗效。因其临床给药剂量远低于TDF，大大减弱了长期服用TDF所带来的严重不良反应，可改善肾功能和骨骼安全参数，而被广泛看好，长期甚至终身抗HIV的前景不容小觑。

根据Birkus et al.,2016.Intracellular Activation of TenofovirAlafenamide and the Effect of Viral and Host Protease Inhibitors.AntimicrobAgents Chemother 60:316-322和 A.S.RAY ET AL.,2016.Tenofovir alafenamide:Anovel prodrug of tenofovir for the treatment of Human ImmunodeficiencyVirus.Antiviral Research 125:63-70两篇文献的报道了替诺福韦艾拉酚胺的细胞内代谢过程。替诺福韦艾拉酚胺的细胞内代谢过程图如图1所示。

两篇文献阐述了TAF的作用机制，相关研究表明在外周血单个核细胞(PBMCs) 内，溶酶体蛋白酶A(CatA)高表达，其催化TAF转化为TFV-Ala，TAF在静止期 PBMCs比激活的PBMCs中转化过程更快。而在肝细胞中，TAF转化为TFV-Ala的过程，由羧酸酯酶1(CES 1)驱动。TFV-Ala在溶酶体酸性环境下，水解成TFV。然后， TFV在腺苷酸激酶(AMP激酶)的作用下，磷酸化为TFVp。最后在NDP激酶的作用下，继续磷酸化为TFVpp(TFV-DP)，TAF整个转化过程见图1。文献中TAF在细胞内代谢过程生成TAF-impurity A、TAF-impurity C和TAF-impurity F三个代谢杂质，目前对其杂质的降解途径和制备方法至今仍未见文献报道。

根据替诺福韦艾拉酚胺的化学结构式推导降解过程(见图2)。替诺福韦艾拉酚胺的合成过程中产生副反应杂质谱图(见图3)。

CN201510943798中报道了富马酸替诺福韦艾拉酚胺三个杂质：替诺福韦艾拉酚胺异丙酯杂质(TAF-impurity H)，替诺福韦艾拉酚胺二苯酯杂质(TAF-impurity I)，替诺福韦艾拉酚胺二酰胺杂质(TAF-impurity J)的合成方法，但是对TAF-impurity A～F杂质的合成途径和制备方法至今仍未见文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供半富马酸替诺福韦艾拉酚胺生产工艺中潜在杂质和降解杂质的制备方法。本发明列明了半富马酸替诺福韦艾拉酚胺的杂质谱图，对改进生产工艺、提高产品内控质量起到指导作用。

本发明提供的式A所示的TAF-impurity A的制备方法，包括下述步骤：

在碱性条件下，使式I所示的化合物进行水解反应，得到式A所示的化合物。

式I中，R选自下述任意一种：甲基、乙基、异丙基、叔丁基、对硝基苄氧羰基、苄氧羰基和叔丁基二甲基硅基，优选叔丁基。

其中，所述反应在溶剂中进行，所述溶剂选自下述任意一种：甲醇，乙醇，乙酸乙酯，四氢呋喃，二氯甲烷和乙腈等，优选四氢呋喃。