[发明专利]一种固定化菌藻微球的制备方法

权利要求书

1.一种固定化菌藻微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、在无菌操作条件下，将小球藻以1×10⁶个/mL-1×10⁷个/mL的接种量接种到培养基中，在温度为25-27℃，转速为110-130转/分钟条件下，光照黑暗循环交替培养60-75小时，得到微藻培养液；

S2、将S1中得到的微藻培养液的pH值调整为4.5-6，加入柠檬酸钠，搅拌20-30分钟，加入氯化钙，搅拌40-50分钟，以2000-2200转/分钟的转数离心分离，得到微藻液；

S3、将地衣芽孢杆菌以5×10⁷个/mL-8×10⁷个/mL的接种量接种到质量分数为1%-3%的葡萄糖水溶液中，在25-35℃培养40-60分钟，得到地衣芽孢杆菌培养液；

S4、将产朊假丝酵母菌以1×10⁶个/mL-3×10⁶个/mL的接种量接种到质量分数为0.3%-0.7%的葡萄糖水溶液中，在30-40℃培养20-30分钟，得到产朊假丝酵母菌培养液；

S5、将S2中制备的微藻液、S3中制备的地衣芽孢杆菌培养液和S4中制备的产朊假丝酵母菌培养液混合均匀，得到混合菌液；

S6、配制含海藻酸钠和氯化镁的载体溶液，将S5中得到的混合菌液加入到载体溶液中，混合均匀后用注射器滴入质量分数为2.6%-3.2%的氯化钙溶液中，在8-10℃固定2-2.5小时后取出，用去离子水脱盐1-2小时，得到固定化菌藻微球。

2.根据权利要求1所述的一种固定化菌藻微球的制备方法，其特征在于，所述S1中培养基的原料按照重量份包括：1-2份葡萄糖、4-6份淀粉糖、0.01-0.03份硫酸锌、0.1-0.3份硫酸镁、0.15-0.3份硫酸铵、0.2-0.4份磷酸二氢钾、0.1-0.3份硝酸钠、9-12份氯化钠和240-260份去离子水。

3.根据权利要求1所述的一种固定化菌藻微球的制备方法，其特征在于，所述S1光照黑暗循环交替培养中，在光照环境下培养的时间为8-10小时，光照强度为3500-3800Lux，在黑暗环境下培养的时间为11-13小时，光照环境、黑暗环境循环交替进行。

4.根据权利要求1所述的一种固定化菌藻微球的制备方法，其特征在于，所述S2中将微藻培养液的pH值调整为5.1-5.4。

5.根据权利要求1所述的一种固定化菌藻微球的制备方法，其特征在于，所述S2中加入柠檬酸钠的量为微藻培养液重量的1.0%-2.5%。

6.根据权利要求1所述的一种固定化菌藻微球的制备方法，其特征在于，所述S2中加入柠檬酸钠的量为微藻培养液重量的1.5%-1.7%。

7.根据权利要求1所述的一种固定化菌藻微球的制备方法，其特征在于，所述S2中加入氯化钙的量为微藻培养液重量的3%-5%。

8.根据权利要求1所述的一种固定化菌藻微球的制备方法，其特征在于，所述S2中加入氯化钙的量为微藻培养液重量的3.8%-4.3%。

9.根据权利要求1所述的一种固定化菌藻微球的制备方法，其特征在于，所述S6中载体溶液中含有质量分数为2%-3%的海藻酸钠和质量分数为0.6-0.8%的氯化镁。

10.根据权利要求1所述的一种固定化菌藻微球的制备方法，其特征在于，所述S6中使用的载体溶液的量为微藻液重量的2.3-2.7倍。