[发明专利]一种固定化菌藻微球的制备方法

说明书

本发明公开了一种固定化菌藻微球的制备方法，包括以下步骤：制备微藻液；制备地衣芽孢杆菌培养液；制备产朊假丝酵母菌培养液；将微藻液、地衣芽孢杆菌培养液和产朊假丝酵母菌培养液混合均匀，得到混合菌液；配制含海藻酸钠和氯化镁的载体溶液，将混合菌液加入到载体溶液中，混合均匀后用注射器滴入质量分数为2.6%‑3.2%的氯化钙溶液中，在8‑10℃固定2‑2.5小时后取出，用去离子水脱盐1‑2小时，得到固定化菌藻微球。采用本发明方法制备的固定化菌藻微球具有污水净化效果好、处理效果稳定、能有效防止二次污染等优点。

技术领域

本发明涉及养殖污水处理领域，尤其涉及一种固定化菌藻微球的制备方法。

背景技术

随着我国畜禽养殖业的规模化发展，每年会产生近十亿吨的畜禽养殖粪污，对有限的水资源造成了严重威胁。

微藻处理法是目前新兴的污水处理方式，畜禽养殖污水中含有的丰富的氮、磷等营养物质可为微藻提供营养，利用微藻处理污水同时可与微藻的大规模生产相藕联，实现资源的循环利用。随着微藻净水效果及藻类和微生物在水体中相互作用研究的深入，菌藻共生系统在畜禽养殖污水上的应用得到了普遍关注。菌藻共生系统是将藻类对污水中氮磷营养物和有机物的摄取去除功效与微生物强大的污染物降解能力有效结合起来的一种互利共生系统。

但由于微藻细胞一般小于30μm，带负电荷，密度接近于水，这些特性使得藻细胞在水中往往处于稳定的悬浮状态，导致微藻细胞会随处理水而大量流失，这不仅会二次污染处理水，而且导致处理污水中微藻细胞生物量难以大量维持（一般仅为0.2-0.6g/L）。低的培养密度导致去除效率低下，使得处理效果稳定性较差。所以，本发明提供了一种氮磷净化效果好、处理效果稳定的固定化菌藻微球的制备方法。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种固定化菌藻微球的制备方法，采用本发明方法制备的固定化菌藻微球具有污水净化效果好、处理效果稳定、能有效防止二次污染等优点。

本发明提供了一种固定化菌藻微球的制备方法，包括以下步骤：

S1、在无菌操作条件下，将小球藻以1×106个/mL-1×107个/mL的接种量接种到培养基中，在温度为25-27℃，转速为110-130转/分钟条件下，光照黑暗循环交替培养60-75小时，得到微藻培养液；

S2、将S1中得到的微藻培养液的pH值调整为4.5-6，加入柠檬酸钠，搅拌20-30分钟，加入氯化钙，搅拌40-50分钟，以2000-2200转/分钟的转数离心分离，得到微藻液；

S3、将地衣芽孢杆菌以5×107个/mL-8×107个/mL的接种量接种到质量分数为1%-3%的葡萄糖水溶液中，在25-35℃培养40-60分钟，得到地衣芽孢杆菌培养液；

S4、将产朊假丝酵母菌以1×106个/mL-3×106个/mL的接种量接种到质量分数为0.3%-0.7%的葡萄糖水溶液中，在30-40℃培养20-30分钟，得到产朊假丝酵母菌培养液；

S5、将S2中制备的微藻液、S3中制备的地衣芽孢杆菌培养液和S4中制备的产朊假丝酵母菌培养液混合均匀，得到混合菌液；

S6、配制含海藻酸钠和氯化镁的载体溶液，将S5中得到的混合菌液加入到载体溶液中，混合均匀后用注射器滴入质量分数为2.6%-3.2%的氯化钙溶液中，在8-10℃固定2-2.5小时后取出，用去离子水脱盐1-2小时，得到固定化菌藻微球。

优选地，S1中培养基的原料按照重量份包括：1-2份葡萄糖、4-6份淀粉糖、0.01-0.03份硫酸锌、0.1-0.3份硫酸镁、0.15-0.3份硫酸铵、0.2-0.4份磷酸二氢钾、0.1-0.3份硝酸钠、9-12份氯化钠和240-260份去离子水。