[发明专利]一种地龙制备的蛋白多肽复配物的制备方法

权利要求书

1.一种地龙制备的蛋白多肽复配物的制备方法，其特征在于：所述的复配物的制备方法为：按重量份计，取葡萄糖3~8份、维生素C0.6~1.2份、地龙蛋白多肽12~24份、大枣20~30份、微量元素0.02~0.04份、浓缩果汁2~5份、植物蛋白粉8~16份、维生素D0.4~0.9份、水25~60份均匀混合，灭菌，得地龙制备的蛋白多肽复配物。

2.根据权利要求1所述的一种地龙制备的蛋白多肽复配物的制备方法，其特征在于：所述的灭菌采用微波灭菌，所述的微波灭菌的条件为：功率260~550W，时间8~16min。

3.根据权利要求1所述的一种地龙制备的蛋白多肽复配物的制备方法，其特征在于：所述的地龙蛋白多肽的制备方法包括：预处理、冻融破壁、蛋白酶共固定化、酶解、超滤纯化和冷冻干燥，其中预处理操作为：取地龙洗净，粉碎后加入3~5倍体积超纯水，在超声波辅助下进行浸提，浸提1~3次后合并浸提液，离心取上清液，得预处理液。

4.根据权利要求3所述的一种地龙制备的蛋白多肽复配物的制备方法，其特征在于：所述的冻融破壁操作为：取预处理液，按质量体积比为1g:1.0~2.0ml加入超纯水，在-30~-12℃下冷冻40~72min，后在5~10℃下解冻，反复冻融1~5次，冻融结束后在8~16℃下离心，取上清液保存。

5. 根据权利要求3所述的一种地龙制备的蛋白多肽复配物的制备方法，其特征在于：所述的蛋白酶共固定化操作为：取壳聚糖粉末，用磷酸盐缓冲液浸泡过夜，后经活化偶联，加入胰蛋白酶溶液和弹性蛋白酶溶液，于冰浴中缓慢搅拌0.7~1.9h ，后冷藏18~27h，用蒸馏水彻底冲洗，过滤干燥得到壳聚糖固定化复合酶。

6.根据权利要求5所述的一种地龙制备的蛋白多肽复配物的制备方法，其特征在于：所述的磷酸盐缓冲液的浓度为50~76mmol/L、pH6.2~6.9。

7.根据权利要求5所述的一种地龙制备的蛋白多肽复配物的制备方法，其特征在于：所述的活化偶联操作为：按与壳聚糖粉末质量比为1:0.1~0.3加入甲基对甲苯基亚砜，在22~30℃下活化0.3~0.6h，后加入壳聚糖粉末体积的0.8~1.5倍的戊二醛进行1.5~2.1h的偶联反应。

8.根据权利要求3所述的一种地龙制备的蛋白多肽复配物的制备方法，其特征在于：所述的酶解操作为：取冻融破壁所得的上清液，按质量体积比为1:0.2~0.5加入壳聚糖固定化复合酶，后在pH5.1~7.5，温度为35~55℃下酶解1.2~3.5h，水浴灭酶，过滤，得酶解液。

9.根据权利要求3所述的一种地龙制备的蛋白多肽复配物的制备方法，其特征在于：所述的冷冻干燥条件为：温度-23~-10℃，真空度8~12Pa。