[发明专利]一种超高效合相色谱-串联质谱法测定烟草中三种苯氧羧酸类农药残留量的方法

权利要求书

1.一种超高效合相色谱-串联质谱法测定烟草中三种苯氧羧酸类农药残留量的方法，其特征在于：用盐酸水溶液对样品进行浸提，并用CH₂Cl₂进行反萃取，以合相色谱-串联质谱直接测定烟草中2,4-滴，2,4,5-涕和麦草畏残留量，具体步骤如下：

a、样品的提取：称取1.0 g样品，置于50 mL具塞离心管中，加入10 mL 0.5 mol/L的盐酸水溶液和10 mL的CH₂Cl₂，并加入100 μL混合内标工作液，涡旋振荡15 min，移取1 mL下层有机相，氮吹近干用1 mL甲醇复溶，进UPC²-MS/MS检测；

b、混合内标工作溶液：分别称取0.01g三种苯氧羧酸类农药的氘代内标标准品到10 mL容量瓶中，用甲醇稀释得到浓度为10.0 μg/mL的混合内标工作溶液；

c、标准工作溶液制备：分别称取0.01g2,4-滴，2,4,5-涕和麦草畏三种标准品，用甲醇稀释并最终配制成具有浓度梯度的含三种农药的混合标准工作溶液；

d、合相色谱-串联质谱测定：吸取以上配制好的不同浓度的农药标准工作溶液，注入合相色谱-串联质谱仪；

合相色谱条件为：色谱柱：ACQUITY UPC² HSS C18柱，规格100 mm×3.0 mm, 1.8 μm；背压：15.2 MPa; 柱温：40 ℃；进样量：2 μL；补偿溶剂：0.1%甲酸甲醇溶液，流速为0.2 mL/min；流动相分别为A相：超临界CO₂，B相：甲醇；流动相流速：2.0 mL/min；梯度洗脱程序如下：0.0～0.5 min， 99% A；0.5～2.5 min，99%A～96%A；2.5～3.2 min，96%A～95%A；3.2～4min，95%A～80%A；4.0～5 min，80%A～99%；5.0～7.0 min，99%A；质谱扫描方式：负离子扫描；离子源：电喷雾电离源(ESI)；离子源温度：150 ℃；脱溶剂气温度：350 ℃；脱溶剂气流量：800 L/h；停留时间：30 ms；毛细管电压：2.4 kV；采集模式：MRM；

e、农药残留量测定结果的计算

以内标法进行农药残留量的定量分析，即以目标物及其对应的同位素内标的定量离子对峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于0.995，对提取后的样品进行测定，测得检出分析物和内标的定量离子对农药的色谱峰面积，代入标准曲线，求得样品中的2,4-滴，2,4,5-涕和麦草畏农药的残留量。

2.根据权利要求1所述的超高效合相色谱-串联质谱法测定烟草中三种苯氧羧酸类农药残留量的方法，其特征在于：标准工作溶液制备的具体配制过程如下：分别称取0.01 g2,4-滴、2,4,5-涕和麦草畏三种农药标准品至不同的10 mL容量瓶中，用甲醇稀释定容，制得1000 μg/mL的标准储备液；分别移取以上三种农药单一标准储备液100μL于同一个10 mL容量瓶中，用甲醇稀释定容至刻度，配得浓度为10.0 μg/mL的混合标准储备液；分别移取混合标准储备液25 μL, 50μL, 100μL, 250 μL , 500 μL 及1000 μL到6个10 mL容量瓶中并加入100 μL的混合内标工作溶液，用甲醇定容；各标准工作溶液的浓度分别为0.025 μg/mL, 0.05 μg/mL, 0.1μg/mL, 0.25 μg/mL, 0.5 μg/mL, 1.0 μg/mL。