[发明专利]一种中性粒细胞型鼻息肉小鼠模型的建立方法在审
| 申请号： | 201711443223.5 | 申请日： | 2017-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN108245532A | 公开（公告）日： | 2018-07-06 |
| 发明（设计）人： | 王水斌 | 申请（专利权）人： | 王水斌 |
| 主分类号： | A61K31/739 | 分类号： | A61K31/739;A61P11/02 |
| 代理公司： | 北京市东方至睿知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11485 | 代理人： | 霍金虎 |
| 地址： | 443100 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鼻息肉 中性粒细胞 小鼠模型 苏木素伊红染色 免疫组织化学 特征性症状 病理过程 病理特征 高碘酸 可控性 脂多糖 鼻腔 检测 滴入 可用 体征 小鼠 嗅觉 相符 防治 成功 研究 | ||
1.一种中性粒细胞型鼻息肉小鼠模型的建立方法，其特征在于，包括：将脂多糖(LPS)滴入小鼠鼻腔中。
2.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，小鼠为无特异性病原体(SPF)6-8周龄的体重为18-23克的C57BL/6J小鼠。
3.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，小鼠鼻腔滴入LPS，每周三次，连续三个月。
4.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，每次滴入的LPS的剂量为5μg LPS/10μl-10μg LPS/10μl。
5.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，通过组织病理改变、鼻腔细胞因子变化、嗅觉功能指标改变来确定模型构建是否成功以及鉴别是否是中性粒细胞型鼻息肉。
6.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，包括：
(1)选择无特异性病原体(SPF)6-8周龄的体重为18-23克的C57BL/6J小鼠，小鼠分为正常对照组、低剂量模型组和高剂量模型组；
(2)低剂量模型组和高剂量模型组小鼠分别鼻腔滴入LPS；正常对照组用无菌生理盐水代替；
(3)通过组织病理改变、鼻腔细胞因子变化、嗅觉功能指标改变来确定模型构建是否成功以及鉴别是否是中性粒细胞型鼻息肉。
7.根据权利要求5或6所述的建立方法，其特征在于，通过苏木素伊红染色、高碘酸希夫反应、MPO、OMP、CD68、TLR4免疫组织化学观察鼻黏膜组织病理学改变，用ELISA检测鼻腔灌洗液中细胞因子IFN-γ、TNF-a、IL-4、IL-6和IL-17的表达水平，用埋藏食物小球实验评估小鼠嗅觉功能。
8.根据权利要求5或6所述的建立方法，其特征在于，所述低剂量模型组中每只小鼠双侧鼻孔每次分别滴入5μg LPS/10μl，每周三次，持续三个月；高剂量模型组中每只小鼠双侧鼻孔每次分别滴入10μg LPS/10μl，每周三次，持续三个月；正常对照组滴入等量的无菌生理盐水，每周三次，持续三个月。
9.根据权利要求5或6所述的建立方法，其特征在于，还包括通过检测正常对照组小鼠鼻腔MPO和OMP免疫组织化学，鼻腔灌洗液中细胞因子IFN-γ、TNF-a、IL-4、IL-6和IL-17细胞因子表达水平，小鼠嗅觉功能，确定正常对照小鼠的基线。
10.根据权利要求5或6所述的建立方法，其特征在于，确定中性粒细胞型鼻息肉小鼠模型建立是否成功的方法包括检测鼻腔滴入LSP后通过苏木素伊红染色观察鼻腔有无鼻息肉形成，以及通过MPO、OMP、CD68、TLR4免疫组织病理改变和鼻腔灌洗液中细胞因子IFN-γ、TNF-a、IL-4、IL-6和IL-17的表达水平进一步证实形成的鼻息肉为中性粒细胞型鼻息肉。
11.一种脂多糖(LPS)在中性粒细胞型鼻息肉小鼠模型的建立方法中的应用。
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