[发明专利]鸡传染性支气管炎活疫苗及其制备方法

说明书

本发明公开了鸡传染性支气管炎活疫苗及其制备方法。本发明以QX‑Like基因型的鸡传染性支气管炎强毒株作为母本，经鸡胚连续传代100多代，获得了致弱的毒株，其微生物保藏编号为：CGMCC No.13292。该弱毒株安全性好，免疫原性良好，遗传性稳定，适合作为防控鸡传染性支气管炎的疫苗株。本发明提供了防治鸡传染性支气管炎的活疫苗，含有防治上有效量的弱毒株和药学上可接受的佐剂或辅料。本发明制备疫苗所用毒种为QX‑Like基因型的鸡传染性支气管炎病毒HC13‑91株与现流行的毒株类型匹配，可获得最佳的免疫保护效果；制备疫苗时所用冻干保护剂为耐热冻干保护剂，可在2～8℃保藏，有效降低了冷链运输成本。

技术领域

本发明涉及鸡传染性支气管炎活疫苗，进一步涉及该鸡传染性支气管炎活疫苗的制备方法及其在防治鸡传染性支气管炎疾病中的应用，属于鸡传染性支气管炎的防治领域。

背景技术

鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis,IB)是由病毒引起的鸡的一种急性、高度接触传染性的呼吸道疾病，是国际兽疫局(OIE)及我国规定的家禽B/二类传染病之一。它主要侵害呼吸系统、泌尿生殖系统和消化系统，其特征为咳嗽、喷嚏、气管啰音、幼鸡流鼻涕、蛋鸡的产蛋数量和质量下降，并能直接导致雏鸡死亡、肾脏病变和输卵管永久性退化。本病呈世界性分布，对养鸡业的危害极大。

鸡传染性支气管炎于1930年首次发现于美国Dakota州，1931年Schalk和Hawn首次报道了本病，临床以咳嗽、喷嚏和气管啰音等呼吸症状为主，成年母鸡输卵管病变而导致蛋品质下降。1936年Beach和Schalm确定本病病原为病毒。1937年Beaudette和Hudson首次从在鸡胚上将IB传代获得成功。1941年分离到马萨诸塞(Massachusetts)株。1951年分离到康涅狄格(Connecticut)株。1956年，Jungherr等报道了Connecticut株与Massachusetts株虽然能够引起相似的症状，但是不能交叉保护或交叉中和，证明了IBV不止一个血清型。目前鸡传染性支气管病毒已流行于世界各地，并表现出了不同的组织嗜性。

1982年，邝荣禄等在广东首次证实IB在中国的存在。此后IB在中国广泛流行。至今IB的临床型已有呼吸型、肾型、肠型、腺胃型等多种，其中还有一些变异的中间体。目前已报道的血清型已有40多个，中国主要以Mass，T，Gray和Holte株为主，同时还存在众多的变异株，对IBV的诊断以及防治造成了诸多困难。

由于IBV存在众多的血清学，抗原变异快，一个变异株产生的抗体对其他血清型没有或仅有部分交叉保护力，因此必须根据当今IBV流行的趋势，采用抗原性一致的弱毒疫苗或多价疫苗联合免疫，争取获得最佳的免疫保护效果。

目前中国市场使用的疫苗主要有H120株、H52株、M41株、LTD3株等。H120株、H52株是中国从荷兰引进的Mass株型疫苗株，对中国大部分血清型的IBV流行毒株有较好的免疫保护效果，主要用于呼吸道型IB的预防，并对某些肾型毒株有一定的交叉免疫保护作用，是中国现在使用最广的两个疫苗株。M41株毒力较强，一般应用于灭活疫苗的制备。LTD3株是哈尔滨兽医研究所刘胜旺研究员利用中国流行毒株致弱而成，目前在市场上使用较少。

但是近年来不断报道免疫过H120株活疫苗的鸡群爆发鸡传染性支气管炎，而且呈现更高的致病性和致死率，而遗传进化分析发现这些毒株大部分为类QX。目前除了做好养殖场的饲养管理和以生物安全为主的环境控制以外，将H120株和国内流行株(类QX)的弱毒疫苗联合使用是较好的免疫接种选择。

总之，开发一种新的类QX株的鸡传染性支气管炎弱毒活疫苗对于鸡传染性支气管炎的防治将具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的之一是构建一株鸡传染性支气管炎病毒弱毒株；该致弱后的IBV弱毒株与现流行的鸡传染性支气管炎病毒基因型匹配，但致病力大大减弱，对1日龄鸡只安全，免疫原性良好，适合做鸡传染性支气管炎活疫苗的毒株；