[发明专利]一种磷虾多糖制备方法

权利要求书

1.一种磷虾多糖制备方法，其特征在于所述的制备方法包括如下步骤：

a）酶解：取150-250质量份磷虾脱脂粉末，加入450-550质量份1M NaOH溶液蒸馏水，在40-50℃水浴下磁力搅拌1.5-2.5h；调节pH至6.8-7.2，加入6-14质量份木瓜蛋白酶，酶解2.5-3.5h；调节pH至9.5-10.5，在40-50℃的恒温水浴中加热，加入2-8质量份胰蛋白酶，酶解2.5-3.5h；

b）热水提取：调节pH至中性后，100℃的水浴下加热灭酶10-20min；静置后3000-4000 r/min下离心30-40min，离心后取上清液，浓缩至原体积的1/18-22，用95％的乙醇进行醇沉，离心，取沉淀物并在35-45℃下烘干；

c）冷冻干燥：将所得固体溶解对溶液用蒸馏水透析45-50h，截留分子量3500；浓缩后冷冻干燥，得多糖粗品。

2.根据权利要求1所述的磷虾多糖制备方法，其特征在于所述的制备方法包括如下步骤：a）酶解：取200质量份磷虾脱脂粉末，加入500质量份1M NaOH溶液蒸馏水，在45℃水浴下磁力搅拌2h；调节pH至7，加入10质量份木瓜蛋白酶，酶解3h；调节pH至10，在45℃的恒温水浴中加热，加入5质量份胰蛋白酶，酶解3h；

b）热水提取：调节pH至中性后，100℃的水浴下加热灭酶15min；静置后3500 r/min下离心35min，离心后取上清液，浓缩至原体积的1/20，用95％的乙醇进行醇沉，离心，取沉淀物并在40℃下烘干；

c）冷冻干燥：将所得固体溶解对溶液用蒸馏水透析48h，截留分子量3500；浓缩后冷冻干燥，得多糖粗品。

3.根据权利要求1或2所述的磷虾多糖制备方法，其特征在于：

使用Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换色谱柱（2.6×50 cm）对多糖粗品进行梯度洗脱，确定分段洗脱适宜的NaCl浓度分别为0,0.1,0.25,0.5和0.75 mol/L，五个多糖组分分别命名为S0，S1，S2，S3和S4；将所得的各多糖组分透析，浓缩，冻干，S4即为所得组分。