[发明专利]由WJMSC干细胞萃取具再生修复功效的胶原蛋白的方法有效
| 申请号： | 201711453478.X | 申请日： | 2017-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN109970848B | 公开（公告）日： | 2023-05-05 |
| 发明（设计）人： | 庄沛荃;陈亦砆 | 申请（专利权）人： | 亚洲沛妍生医股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/78 | 分类号： | C07K14/78;C12N5/0735 |
| 代理公司： | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人： | 韩蕾;姚亮 |
| 地址： | 中国台湾台北市内湖*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | wjmsc 干细胞 萃取 再生 修复 功效 胶原 蛋白 方法 | ||
1.一种由瓦顿氏凝胶间叶干细胞(Wharton’s Jelly mesenchymal stem cells)萃取胶原蛋白的方法，包含：
步骤一：将瓦顿氏凝胶间叶干细胞于第一培养液中培养16～24小时；其中所述第一培养液中含有人类碱性纤维母细胞生长因子(human basic fibroblast growthfactor)；
步骤二：移除第一培养液，并加入第二培养液培养36～48小时；所述第二培养液包含人类碱性纤维母细胞生长因子、脯氨酸(proline)与维生素C(L-ascorbic acid)；
步骤三：收集细胞，并加入细胞裂解液，作用0.5～2小时，加入无机盐溶液以获得混合液，将混合液于4℃作用24～48小时；以及
步骤四：离心混合液并收集沉淀物，并以保存溶液回溶沉淀物，以获得胶原蛋白样品。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述第一培养液中含有2～8ng/mL的人类碱性纤维母细胞生长因子。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述第一培养液中含有4ng/mL的人类碱性纤维母细胞生长因子。
4.如权利要求1所述的方法，其中所述第二培养液包含2～8ng/mL的人类碱性纤维母细胞生长因子、0.2～2mM的脯氨酸与5～50μM的维生素C。
5.如权利要求4所述的方法，其中所述第二培养液包含4ng/mL的碱性纤维母细胞生长因子、0.2mM的脯氨酸与5～50μM的维生素C。
6.如权利要求1所述的方法，其中所述无机盐溶液为过硫酸铵(ammonium sulfate)溶液或是氯化钠(NaCl)溶液。
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