[发明专利]一种PPARs对巨噬细胞极化影响的研究方法

说明书

本发明公开了一种PPARs对巨噬细胞极化影响的研究方法，该方法通过建立细粒棘球蚴感染小鼠模型以及体外原头蚴与巨噬细胞共培养体系，检测巨噬细胞PPARs的表达水平及其对巨噬细胞极化的调节，并在此基础上抑制PPARs通路，进一步探讨PPARs对巨噬细胞极化的影响，及在包虫病免疫逃逸过程中的作用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种PPARs对巨噬细胞极化影响的研究方法。

背景技术

包虫病(Hydatid disease)又称棘球蚴病，是棘球蚴绦虫(Echinococcusgranulosus) 的幼虫在人畜体内寄生，产生的一种人畜共患的慢性感染性疾病，也是地方性感染性疾病， 在牧区高发。常见的有囊型包虫病(Cystic echinococcosis,CE)和泡型包虫病(Alveolar echinococcosis,AE)两种，分别是由细粒棘球蚴和多房棘球蚴幼虫寄生在人畜体内而感染 的；在我国常见的是由细粒棘球蚴绦虫引起的囊型包虫病(Cysticechinococcosis,CE)。 这对公共卫生和经济造成重大影响。

包虫病全球分布广泛，常见于非洲、南美、欧亚大陆和中国北部等，在我国主要分布于 较贫困边远的农牧区如新疆、西藏、内蒙古、四川、青海和黑龙江等地，其中新疆较为高发。 该病属于自然疫源性疾病，也是人畜共患病，主要在动物与人之间以及动物与动物之间相互 感染传播形成循环。人和牛、羊、马等食草类动物为中间宿主，可经口误食犬科类动物排出 的含虫卵的粪便而感染，近几年经流行病学调查证实棘球蚴病疫区呈逐年扩大趋势，即由西 北部开始向东南部发展，由牧区向非牧区扩散。每年都会有近四十万的人饱受该病的困扰 和几千万人受到威胁，每年对畜牧业造成的经济损失高达十几亿。由于包虫病对人类身体健 康危害严重，同样对畜牧业的发展造成极大威胁，在世界范围内被认为是严重危害公共卫生、 环境安全与经济发展的问题。因此有控制传染源，切断传播途径，有效的预防包虫病成为一 个至关重要的问题。

包虫幼虫通过人体组织屏障和抵抗宿主早期炎性反应及免疫反应，侵入宿主组织后生长 缓慢,往往数年才出现症状。主要寄生在肝、肾和肠系膜等部位，以机械性损害为主，受累 部位常表现为轻微的疼痛和脏器功能障碍，也可表现为过敏反应和毒性反应，严重时甚至可 能因过敏性休克致死。目前包虫病的治疗有外科手术和药物治疗。临床上一般首先采取手术 治疗，其次为药物治疗，这样可以有效地提高治愈率，减少复发率，然而包虫病的包囊较脆 弱易破裂，在手术过程中可能导致其损坏意外破裂，包囊中的部分原头蚴可能进入机体各个 部位，造成严重的二次感染，这一过程大大提高了包虫病治疗难度。目前，对包虫病的致病 机制仍不清楚，尚无有效的早期诊断方法，预防效果不明显。因此，研究包虫病的感染机制， 尤其是早期虫体如何逃避宿主的免疫杀伤作用显得尤为重要，这对包虫病的预防治疗非常重 要。

细粒棘球蚴感染宿主后引起机体的免疫应答机制十分复杂，在人体免疫力正常的时候可 能持续几年甚至几十年都无症状，呈潜伏生长转移，造成持续而严重的慢性损害。免疫保护 和免疫损伤并存是主要免疫表现，而包虫能在宿主体内存活主要依赖于有效的免疫逃逸机 制，棘球蚴感染早期可改变宿主的免疫反映形式：Th1细胞免疫向Th2细胞转换，从而起到 逃避宿主免疫杀伤的作用。

过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activatedreceptors, PPARs),是一种致密分子构成的类固醇受体,属于由配体激活的Ⅱ型核受体超家族成员。分 为三个亚型即α、β和γ。不同的亚型其表达部位及发挥的作用也不尽相同。

PPAR-α主要在人和鼠的免疫细胞上表达，包括巨噬细胞、淋巴细胞以及树突状细胞， 以及肝、肾、褐色脂肪组织(BAT),在脂肪酸氧化、应激、炎症反应以及肝脏的纤维化中起重 要。PPAR-γ主要在脂肪组织、肝、肾、单核巨噬细胞、平滑肌细胞等表面表达。有研究显 示，PPAR-γ的功能复杂多样，它参与抗炎反应，调节糖脂代谢，诱导肿瘤细胞的凋亡和分 化，抑制肿瘤血管生成，抗动脉粥样硬化，改善心功能和参与心室重构等。