[发明专利]一种基于分子生物学的黄腿螯蜂的鉴别引物及方法有效
申请号: | 201711458336.2 | 申请日: | 2017-12-28 |
公开(公告)号: | CN107904318B | 公开(公告)日: | 2021-05-14 |
发明(设计)人: | 田俊策;吕仲贤;王国荣;郑许松;徐红星 | 申请(专利权)人: | 浙江省农业科学院 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 夏艳 |
地址: | 310021 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 分子生物学 黄腿螯蜂 鉴别 引物 方法 | ||
1.一种基于分子生物学的黄腿螯蜂的鉴别引物,其特征在于,引物为CBYF和CBYR,其序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
2.一种基于分子生物学的黄腿螯蜂的鉴别方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、提取待检测样本的基因组DNA作为PCR的模板;
步骤2、对待检测样本基因组DNA进行PCR扩增,得到PCR扩增产物并进行电泳分离鉴定;
步骤3、于342bp处观察到条带,则该待测样本为黄腿螯蜂,
否则,则该待测样本不是黄腿螯蜂;
所述PCR扩增所用的引物为CBYF和CBYR,其序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
3.根据权利要求2所述的鉴别方法,其特征在于,所述PCR扩增体系如下: PCR体系25μL,包括ddH2O 9.5μL、2×Taq PCR Master Mix 12.5µL、待检测样本DNA模板 1.0µL、引物CBYF 1.0µL、引物CBYR 1.0µL。
4.根据权利要求2所述的鉴别方法,其特征在于,所述PCR扩增程序为:94℃ 下预变性5min,94℃下变性30s,62℃下退火30s,72℃ 下延伸1min,35个循环,循环结束后,72℃下延伸10min,最后反应终止在4℃。
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